公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號(hào)
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CA46細(xì)胞
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T25
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FS-X3343
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產(chǎn)品名稱:
形態(tài)特性:母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
特征特性:該細(xì)胞源自Burkitt's瘤患者的B細(xì)胞,EBNA、Fc陰性。
培養(yǎng)條件:RPMI1640+20%FBS
傳代方法:1:2傳代
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
正十六烷標(biāo)準(zhǔn)溶液100ng/ul溶劑:異辛烷,GC-TCD測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)物eNOS-3(Mouse Endothelial nitric oxide synthase 3)ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3豚鼠衰老關(guān)鍵蛋白5(FBLN5)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
ICP光譜儀檢定溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 體:3%HNO3CETP(Mouse cholest erolester transfer protein)ELISA Kit 小鼠膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白豚鼠質(zhì)金屬蛋白酶-10(MMP-10)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
ICP光譜儀檢定溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Cr、Ni、Zn:2.00ug/ml Cu、Ba、Mn:1.0LH(Mouse luteotropic hormone)ELISA Kit 小鼠促黃體豚鼠血小板因子4(PF4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
ICP光譜儀檢定溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Cr、Ni、Zn:5.00ug/ml Cu、Ba、Mn:2.5aGT(Mouse angiotensinogen)ELISA Kit 小鼠血管緊張素原豚鼠血小板膜糖蛋白II b/III a(GPIIb/IIIa)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
ICP光譜儀檢定溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Cr、Ni、Zn:1.00ug/ml Cu、Ba、Mn:0.5Hsp-60(Mouse heat shock protein 60)ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白60豚鼠特異性抗原2(SSFA2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
ICP光譜儀檢定溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) (空白)CG(Mouse Chorionic Gonadotrophin)ELISA Kit 小鼠絨毛膜促性腺豚鼠尿嘧啶核苷化酶2(UPP2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
ICP光譜儀檢定溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 波長(zhǎng)檢定用MDA(Mouse malondialchehyche)ELISA Kit 小鼠二豚鼠狀腺素(T4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
蔗糖水溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 蔗糖水10.1% ;質(zhì):水SOD(Mouse Super Oxidase Dimutase)ELISA Kit 小鼠超氧化物歧化酶豚鼠促生長(zhǎng)釋放(GHRH)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
蔗糖水溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 蔗糖水30.3%;質(zhì):水C-Peptide(Mouse C-Peptide)ELISA Kit 小鼠C肽豚鼠熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
蔗糖水溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 蔗糖水50.1%;質(zhì):水HSP gp96(Mouse Heat Shock Protein glycoprotein 96)ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白糖蛋白96豚鼠III型前膠原氨端原肽(PIIINP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
火焰光度計(jì)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 體:0.1%鹽CH50(Mouse 50% complement hemolysis)ELISA Kit 小鼠血清總補(bǔ)體豚鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白7(IGFBP-7)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
紫外分光光度計(jì)溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)體: 0.001mol/L HClO4B7-2/sCD86(Mouse soluble Cluster of differentiation 86)ELISA Kit 小鼠可溶性CD86豚鼠鞘脂激活蛋白原(PSAP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
銀標(biāo)準(zhǔn)溶液1000μg/mL,體:1%硝INS(Mouse Insulin)ELISA Kit 小鼠胰島素豚鼠核孔蛋白160kda(NUP160)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
十二烷磺鈉:1000±20μg/mLHIF-1 Alpha(Mouse hypoxia-inducible factor 1 Alpha)ELISA Kit 小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α豚鼠蛋白C(PROC)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
砷標(biāo)準(zhǔn)溶液1000μg/mL,體:1%硝NN-T4(Mouse Neonatal Thyroxine)ELISA Kit 小鼠新生狀腺素豚鼠多肽YY (PYY)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
CA46細(xì)胞總?cè)~綠素Elisa試劑盒組織蛋白酶B抗原Mad2L2 有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白2抗體
花青素合成酶Elisa試劑盒組織蛋白酶L抗原Mad2L1 有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白1抗體
黃烷酮3-羥化酶Elisa試劑盒成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子(多肽)MAD2 有絲分裂阻滯缺陷蛋白2抗體
查爾酮合酶Elisa試劑盒CREB結(jié)合蛋白抗原MAD1 Mad1抗體
查爾酮異構(gòu)酶Elisa試劑盒染色盒同源物3抗原MACC1 結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體
二氫黃酮還原酶Elisa試劑盒CBX5(多肽)M2-PK/PKM2 小鼠抗酮激酶-M2抗體
花青素還原酶Elisa試劑盒克拉拉蛋白(Clara蛋白)抗原M2-PK/PKM2 酮激酶-M2抗體
核糖核Elisa試劑盒CC趨化因子受體2/5抗原M2-PK (pyruvate Kinase M2) 酮激酶-M2
維生素AElisa試劑盒嗜粒趨化蛋白CCL1抗原M Cadherin M鈣粘附分子抗體