產品名稱:神經母細胞瘤細胞;IMR-32
形態(tài)特性:存在兩種細胞類型,小的神經母細胞樣細胞和大的透明成纖維樣細胞
生長特性:貼壁生長
特征特性:該細胞是1967年4月由NicholsWW,LeeJ和DwightS建立,來源于一名13月齡白人男嬰腹部腫塊,臨床診斷為神經母細胞瘤,伴有極少部位的類器官樣分化。
培養(yǎng)條件:MEM+10%FBS
傳代方法:1:2傳代
產品名稱
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規(guī)格
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貨號
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IMR-32細胞
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T25
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FS-X3353
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凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu),可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
1,5-環(huán)辛二烯 99%PLAUR/uPAR (Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor) ELISA Kit 兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體豚鼠穿孔蛋白1/成孔蛋白(PRF1/PFP)酶聯吸附測定試劑盒
順,順-1,5-環(huán)辛二烯 99%uPA (Rabbit urokinase plasminogen activator) ELISA Kit 兔尿激酶型纖溶酶原激活物豚鼠生長停滯特異性蛋白6(Gas6)酶聯吸附測定試劑盒
環(huán)己 AR,98%hs-CRP (Rabbit high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit 兔超敏C反應蛋白豚鼠胰島素降解酶(IDE)酶聯吸附測定試劑盒
鄰二二酯 CP,99%MMP-1 (Rabbit matrix metalloproteinase 1) ELISA Kit 兔質金屬蛋白酶1豚鼠激酶錨定蛋白1(AKAP1)酶聯吸附測定試劑盒
N,N'-二脲 98%8-epi-PGF2 Alpha (Rabbit 8-epi-prostaglandin F2alpha) ELISA Kit 兔8-異構前列腺素豚鼠末端運動神經元生存蛋白1(SMN1)酶聯吸附測定試劑盒
鄰二二烯酯 CPPF-4/CXCL4 (Rabbit Plaet Factor 4) ELISA Kit 兔子血小板因子4豚鼠肌肉果糖激酶(PFKM)酶聯吸附測定試劑盒
鄰二二烯酯 98.0%Beta-TG (Rabbit Beta-Thromboglobulin) ELISA Kit 兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白豚鼠胃泌素抑制肽(GIP)酶聯吸附測定試劑盒
叔十二硫 98%NE (Rabbit neutrophil elastase) ELISA Kit 兔子中性粒彈性蛋白酶豚鼠波形蛋白(VIM)酶聯吸附測定試劑盒
二乙二一己 96%C3a (Rabbit Complement fragment 3a) ELISA Kit 兔子補體片斷3a豚鼠成纖維生長因子4(FGF4)酶聯吸附測定試劑盒
2-乙-1,3-己二 98%MMP-3 (Rabbit matrix metalloproteinase 3) ELISA Kit 兔子質金屬蛋白酶3豚鼠轉化生長因子β2(TGF-β2)酶聯吸附測定試劑盒
2-乙-1,3-己二 分析標準品TRAP-5b ELISA Kit(Rabbit) 兔酶TRAP-5b ELISA試劑盒豚鼠白分化抗原CD30(CD30)酶聯吸附測定試劑盒
乙二叔丁 99%sCD40L (Rabbit differentiation 40 ligand) ELISA Kit 兔子可溶性CD40配體豚鼠多巴受體D5(D5R/DRD5)酶聯吸附測定試劑盒
正庚 AR,98.0%MHC I /RLA I (Rabbit major histocompatibility complex I ) ELISA Kit 兔主要組織相容性復合體Ⅰ類豚鼠T特異性鳥苷三酶(Tgtp)酶聯吸附測定試劑盒
1,6-己二 CP,98.0%BLAP ELISA Kit(Rabbit) 兔骨堿性酶 ELISA 試劑盒豚鼠甘肽/甘素(GAL)酶聯吸附測定試劑盒
1,6-己二 AR,99.0%BGP(Osteocalcin/Bone Gla-protein)ELISA Kit 兔骨鈣素 ELISA試劑盒豚鼠多巴受體D3(D3R/DRD3)酶聯吸附測定試劑盒
IMR-32細胞乙烯利Elisa試劑盒角蛋白8(多肽)LIR-6 白球蛋白樣受體6抗體
三腺苷酶Elisa試劑盒酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原Lipophilin B 親脂性蛋白B抗體
幾丁質酶Elisa試劑盒鈣激活離子通道4抗原LIPK 脂肪酶家庭成員K抗體
木聚糖酶Elisa試劑盒c-mer原癌因酪氨激酶抗原Lipin 1 脂酯酶LPIN1抗體
碳酐酶Elisa試劑盒c-Myc tag標簽多肽LIPG/Endothelial lipase 內皮脂肪酶抗體
碳酐酶6Elisa試劑盒AU5 tag標簽抗原Lingo-1 Nogo受體反應蛋白抗體
過氧化氫酶Elisa試劑盒AU1 tag標簽多肽Lin-28B RNA結合蛋白LIN28B抗體
脈帶花葉病Elisa試劑盒Glu-Glu Tag多肽蛋白Lin28 RNA結合蛋白LIN28抗體
金屬硫蛋白Elisa試劑盒環(huán)核苷陽離子通道蛋白α2抗原LIMS1 整合素和生長因子樣蛋白1抗體
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