公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱：神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞；U251
形態(tài)特性：多角

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)條件：DMEM(高糖）+10%FBS

傳代方法：1：2傳代
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

壬 97%VTG ELISA Kit  鯉魚卵黃蛋白原豚鼠髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

壬 98%GnRH ELISA Kit   魚類促性腺釋放豚鼠胰蛋白酶(TRY)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

季戊四 AR,98.0%Fish Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit  魚類狀腺原氨豚鼠抗原6復(fù)合物因座A(Ly6a)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

乙二  99.4%Fish Cortisol ELISA Kit  魚類皮質(zhì)豚鼠色素P450氧化還原酶(CPR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三鈉 97%Fish high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit   魚類超敏C反應(yīng)蛋白豚鼠TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子2(TAF2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三 97%Fish Oste ocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit  魚骨鈣素/骨谷氨蛋白豚鼠狀腺過氧化物酶(TPO)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

阿斯巴甜 98%Cherax quadricarinatus lipovilin/vilin,Lv/Vn ELISA Kit   紅螯光殼螯蝦卵黃脂蛋白/卵黃蛋白豚鼠降鈣素(CT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

碳鎘 AR,98%Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV ELISA Kit  羅氏沼蝦諾達(dá)病豚鼠胸腺表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

碳鎘 CP,97%Cobra venom factor,CVF ELISA Kit  蛇因子豚鼠脂酶B(PLB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

碳鎘 99.99%bullfrog growth hormone,GH ELISA Kit  牛蛙生長豚鼠亞四氫葉還原酶(MTHFR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

銨 CP,98.0%Bombyx mori Livetin,LT ELISA Kit  家蠶卵黃蛋白豚鼠肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

芐酯  >99.0%(GC)Nasoniavitripennis vilogenin,Vtg ELISA Kit  蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原豚鼠巨噬趨化因子(MCF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

 CP,98.5%Plant phosphatidylglycerol,PG ELISA Kit  植物脂酰甘油豚鼠纖維膠凝蛋白1(FCN1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

 >99% (GC)Plant zeatin riboside,ZR ELISA Kit  植物玉米索核苷豚鼠胃動蛋白1(GKN1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

酰 AR,99.0%Plant Gibberellic Acid,GA ELISA Kit  植物赤霉素豚鼠CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
U251細(xì)胞植Elisa試劑盒少突膠質(zhì)跨膜蛋白抗原LHR/CGR  促黃體**素受體抗體

原花青素Elisa試劑盒緊密連接蛋白1抗原(C端)LHR/CGR  促黃體**素受體抗體

生長Elisa試劑盒前列腺素氧化環(huán)化酶1抗原LH beta  促黃體**素抗體

麥芽糖酶Elisa試劑盒肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1A多肽抗原LH  人促黃體**素抗體

ATP合成酶Elisa試劑盒二氫嘧啶酶樣2CRMP2抗原LH  促黃體**素抗體

漆酶Elisa試劑盒降鈣素受體樣蛋白抗原LGR4/GPR48  G蛋白偶聯(lián)受體48抗體

類黃酮Elisa試劑盒cRaf/Raf1抗原LGI4  含亮氨神經(jīng)膠質(zhì)瘤失活蛋白4抗體

乙烯合成???Elisa試劑盒MEK1/MAPKK1抗體(N-端)LGI1/ETL1  富含亮氨膠質(zhì)瘤失活蛋白1抗體

乙烯氧化酶Elisa試劑盒促腎上腺皮質(zhì)釋放因子LGALS3BP  可溶性半糖凝集素3結(jié)合蛋白抗體