產(chǎn)品名稱：多形性惡性膠質(zhì)瘤；T98G[T98-G]
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)條件：DMEM(高糖)+10%FBS

傳代方法：按1:3傳代

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

姜酮  98%Anti- Beta-Amyloid(1-40)/FITC  熒光素標(biāo)記β淀粉樣肽（1-40）抗體IgG豚鼠信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子1(STAT1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

姜酮  97%,香料級(jí)Beta-Amyloid 1-40(CT)/FITC  熒光素標(biāo)記β淀粉樣肽（1-40）C端抗體IgG豚鼠過氧化還原酶2(PRDX2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

乙叔丁酯 99%Anti- Beta-Amyloid 1-40(CT)mouse/FITC  熒光素標(biāo)記β淀粉樣肽 1-40 C端抗體IgG豚鼠前列腺性酶(ACP3/PAP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

叔丁酯 98%Anti- Beta-Amyloid 1-42 CT(A Beta1-42)/FITC  熒光素標(biāo)記β淀粉樣肽1-42 (C端抗體)IgG豚鼠骨保護(hù)素(OPG)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

(R)-(+)-苧烯 97%Anti- Beta-Amyloid(25-35)/FITC  熒光素標(biāo)記β淀粉樣肽（25-35）抗體IgG豚鼠色素C(Cyt-C)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

膦酰乙三乙酯 98%Beta-Amyloid(31-35)/FITC  熒光素標(biāo)記β淀粉樣肽（31-35）抗體IgG豚鼠胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

酰乙酯  95%Anti-14-3-3/FITC  熒光素標(biāo)記14-3-3蛋白抗體IgG豚鼠強(qiáng)肽(Dyn)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

赤蘚糖 99%Anti-14-3-3 ζ(phospho Ser58)/FITC  熒光素標(biāo)記化14-3-3 ζ抗體IgG豚鼠抗鈣調(diào)素特異抗體(CAM-Ab)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

衣康 AR,99.8%Anti-2,4-D/FITC  熒光素標(biāo)記2，4-二氧乙抗體IgG豚鼠降鈣素原(PCT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

赤蘚糖 99%Anti-4E-BP1/EIF4EBP1/FITC  熒光素標(biāo)記4E結(jié)合蛋白1抗體IgG豚鼠性別決定區(qū)Y框蛋白3(SOX3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

磺酰 96%Anti-4EBP1(phospho Ser64) /FITC  熒光素標(biāo)記化4E結(jié)合蛋白1抗體IgG豚鼠蛋白激酶抑制劑β(PKIβ)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

磺酰 98%Anti-4EBP1(phospho Thr37/46) /FITC  熒光素標(biāo)記化4E結(jié)合蛋白1抗體IgG豚鼠成纖維生長(zhǎng)因子19( FGF19)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,介質(zhì):1.0 mol/L HNO3Anti-phospho-4EBP1 (Ser65/Thr70)/FITC  熒光素標(biāo)記化eIF4E結(jié)合蛋白抗體IgG豚鼠接觸蛋白3(CNTN3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

銻標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,體:6.0 mol/L HClAnti-14-3-3/RBITC  紅色熒光素羅丹明標(biāo)記14-3-3抗體IgG豚鼠谷氨脫羧酶(GAD)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

銻標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,，溶劑：鹽Anti-5-HT/FITC  熒光素標(biāo)記5-羥色抗體IgG豚鼠發(fā)動(dòng)蛋白2(DNM2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
T98G細(xì)胞多糖Elisa試劑盒防御素β1抗原(人)LCE2B  晚期包膜蛋白2B抗體

可溶性多糖Elisa試劑盒防御素β2抗原（小鼠）LCE1A  晚期包膜蛋白1抗體

赤霉素1Elisa試劑盒防御素β2抗原（大鼠）LCAT  卵酯膽固酰轉(zhuǎn)移酶抗體

赤霉素2Elisa試劑盒凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗原LCA5L  致盲因LCA5樣蛋白抗體

L-半糖-1-酯酶Elisa試劑盒鴨型肝炎A病抗原LCA5  致盲因LCA5蛋白抗體

L-半糖-1-脫氫酶Elisa試劑盒結(jié)蛋白抗原LCA/Lens culinaris agglutinin  扁豆凝集素

L-半糖-1，4-內(nèi)脂脫氫酶Elisa試劑盒抑癌蛋白DKK1抗原LC3C  微管相關(guān)蛋白輕鏈3C抗體

甘露糖-6-P異構(gòu)酶Elisa試劑盒DMBT1抑癌因抗原LC3B/MAP LC3β/MAP1A  自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體

糖糖內(nèi)脂酶Elisa試劑盒DNA依賴蛋白激酶催化亞多肽抗原LC3 α/MAP1A/MAP LC3 Alpha/Beta  自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體