產(chǎn)品名稱：神經(jīng)干細(xì)胞；mNSCs-11

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌???存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

鏑標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、猴、?；阴］o酶A羧化酶抗體IgG豚鼠趨化因子CCL3樣蛋白1(CCL3L1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

銪標(biāo)準(zhǔn)溶液  1000μg/ml Anti-AchE/FITC  熒光素標(biāo)記乙酰膽堿酶抗體IgG豚鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鉺標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,體:1.0 mol/L HNO₃Anti-CHRNA2/FITC  熒光素標(biāo)記煙堿型乙酰膽堿受體A2(神經(jīng)型)抗體IgG豚鼠唾液結(jié)合球蛋白樣凝集素10(SIGLEC10)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鉺標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mL，體：10%HCLAnti- Beta-Actin/Gold  金標(biāo)記β-肌動(dòng)蛋白抗體IgG豚鼠血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

銪標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mL in 10%HCLAnti-Acinus L/S/FITC  熒光素標(biāo)記腺泡Acinus L/S抗體IgG豚鼠STAT蛋白抑制因子1(PIAS1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-Acinus(phospho S1180)/FITC  熒光素標(biāo)記腺泡化Acinus抗體IgG豚鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氟離子（F-）標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-Ack1/FITC  熒光素標(biāo)記Ack1抗體IgG豚鼠趨化素樣因子超家族成員4(CKLFSF4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氟離子（F-）標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L，溶劑：水Anti-Ack1(Phospho-Tyr284) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化Ack1抗體IgG豚鼠XC趨化因子受體1(XCR1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氟離子（F-）標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000mg/L，體:水Anti-Phospho-Ack1(Tyr857/858) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、小鼠化Ack1抗體IgG豚鼠核孔蛋白37kda(NUP37)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

金標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-Phospho-Ack1(Tyr326) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化Ack1抗體IgG豚鼠胃蛋白酶原A(PGA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

金標(biāo)準(zhǔn)溶液100.0μg/g，體:0.5mol/l鹽Anti-ACTH 1-39/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠ACTH抗體IgG豚鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

金標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/mlAnti-ACTH(7-23)/FITC  熒光素標(biāo)記促腎上腺皮質(zhì)(7-23)抗體IgG豚鼠雌二受體(ER)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鎵標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlACTH(18-39)/FITC  熒光素標(biāo)記ACTH（18-39）抗體IgG豚鼠晶狀體蛋白αB (CRYαB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鍺標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-Actin Alpha /Alpha-SMA/FITC  熒光素標(biāo)記Actin α 蛋白抗體IgG豚鼠跨膜絲氨蛋白酶2(TMPRSS2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

釓標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-Actin Alpha / Alpha-SMA/RBITC  紅色熒光素標(biāo)記肌動(dòng)蛋白α抗體IgG豚鼠鈣腔蛋白(CALU)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
mNSCs-11細(xì)胞線粒體呼吸鏈復(fù)合物VElisa試劑盒E.coli O6大腸桿體蛋白Laminin Beta 2/Laminin S  層粘連蛋白β2抗體

黃酮合成酶Elisa試劑盒普通大腸埃希體蛋白（非致病性）Laminin Beta 1  層粘連蛋白β1抗體

氨氨轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒EphA1-R受體抗原Laminin B2 gamma 1  層粘連蛋白B2γ1抗體

天門冬氨氨轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒紅**素受體抗原Laminin alpha 5  層粘蛋白α5抗體

過氧還蛋白Elisa試劑盒化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗原Laminin alpha 4  層粘蛋白α4抗體(Lamininα4)

硫氧化還原蛋白Elisa試劑盒絲裂原活化蛋白激酶抗原Laminin alpha 4  層粘蛋白α4抗體(Lamininα4)

NADP-蘋果脫氫酶Elisa試劑盒絲裂原活化蛋白激酶3抗原Laminin alpha 1  層粘蛋白α1抗體

甘油脫氫酶Elisa試劑盒絲裂原活化蛋白激酶4抗原Laminin 5  層粘連蛋白5(laminin γ2)抗體

膽堿加氧酶Elisa試劑盒人化雌受體α多肽抗原Laminin 2 alpha  層粘蛋白α2抗體