公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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HBVSMC細(xì)胞
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T25
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FS-X3365
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產(chǎn)品名稱:腦微血管平滑肌細(xì)胞;HBVSMC
培養(yǎng)條件:平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基,scienCA-ll,貨號:1101
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
鎂標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-ADRB3/ Beta3-AR /FITC 熒光素標(biāo)記腎上腺素能受體β3抗體IgG豚鼠表皮調(diào)節(jié)素(EREG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
汞標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-CD8/RBITC 羅丹明標(biāo)記CD8抗體IgG豚鼠尿激酶型纖溶酶原激活因子(PLAU/uPA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
汞標(biāo)準(zhǔn)溶液 100ml/L,溶劑:3%硝Anti-AD7C/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)絲蛋白抗體IgG豚鼠外信號調(diào)節(jié)激酶1(ERK1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
汞標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,體:3%硝Anti-AD7C-NTP/NTP/AF /FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)絲蛋白抗體(人)IgG豚鼠粘蛋白2(MUC2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
汞標(biāo)準(zhǔn)溶液10.0ng/g,體: 0.4mol/L HCL,K+2.2mg/L,Na+23mg/LAnti-AE3/FITC 熒光素標(biāo)記陰離子交換蛋白3抗體IgG豚鼠絲氨蛋白酶12(PRSS12)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-AEV/FITC 熒光素標(biāo)記禽腦脊髓炎病抗體IgG豚鼠過氧化物酶體增殖物激活受體δ( PPAR-δ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液 500 mg/L,溶劑:微量硫Anti-AEBP1/FITC 熒光素標(biāo)記脂肪增強(qiáng)結(jié)合蛋白1抗體IgG豚鼠神經(jīng)肽Y(NPY)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/mL,體: 1%HClAnti-AF6/Afadin/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體IgG豚鼠胰島素樣蛋白3(INSL3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鈮標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-phospho-Afadin(Ser1718) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體IgG豚鼠鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-AGER/RAGE /FITC 熒光素標(biāo)記晚期糖化終末產(chǎn)物特異性受體抗體IgG豚鼠突觸足蛋白(SYNPO)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L,溶劑:1%硝Anti-AGEs/FITC 熒光素標(biāo)記晚期糖化終末產(chǎn)物抗體IgG豚鼠CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液 100(20℃)μg/mL,體:1%HNO3Anti-AGER/RAGE/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記晚期糖化終末產(chǎn)物特異性受體抗體IgG豚鼠Pirin蛋白(PIR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/mlAnti-Aggrecan/FITC 熒光素標(biāo)記軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗體IgG豚鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽B受體(CCKBR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
亞硝鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-Aggrecan2/ADAMTS-5/FITC 熒光素標(biāo)記軟骨蛋白聚糖抗體IgG豚鼠血小板因子3(PF3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
硝根離子(NO3-)標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-Agrin/FITC 熒光素標(biāo)記聚集蛋白抗體IgG豚鼠質(zhì)衍生因子2(SDF-2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
HBVSMC細(xì)胞葡萄糖變位酶Elisa試劑盒鼠疫耶爾森氏F1莢膜蛋白(C端多肽)LALBA/alpha Lactalbumin 清蛋白α抗體
谷氨酰tRNA還原酶Elisa試劑盒腦型脂肪結(jié)合蛋白抗原LAIR-2/CD306 白相關(guān)球蛋白樣受體2抗體
5-氨乙酰合成酶Elisa試劑盒Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗原LAIR-1/CD305 白相關(guān)球蛋白樣受體1抗體
酮Elisa試劑盒粘著斑激酶抗原LAG-3/CD223 活化因-3抗體
蕓苔素內(nèi)酯Elisa試劑盒化粘著斑激酶抗原Lactoferrin 鐵蛋白抗體
脂肪合成酶Elisa試劑盒化粘著斑激酶抗原Lactic acid bacterial protein surface 體表面蛋白抗體
乙脫氫酶Elisa試劑盒Fas活化的絲/蘇氨激酶抗原LACTB2 β內(nèi)酰酶樣蛋白2抗體
脫氫酶Elisa試劑盒原纖維蛋白1抗原LACE1 泌升高蛋白1抗體
酮脫羧酶Elisa試劑盒纖維母生長因子4抗原KY/Kyphoscoliosis peptidase 脊柱側(cè)后凸畸形肽酶抗體
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