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產(chǎn)品名稱：膀胱癌細胞；EJ
形態(tài)特性：上皮細胞樣

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法：1：2傳代
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

碲標準溶液 100μg/ml，體:HCIAnti-APS(Ser598)/FITC  熒光素標記化APS抗體IgG豚鼠衰變加速因子(DAF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鋱標準溶液 1000μg/mlanti-AQP1/FITC  熒光素標記水通道蛋白-1抗體IgG豚鼠著絲粒蛋白B(CENPB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

1000μg/mL，體:10%HClAnti-AQP-2/FITC  熒光素標記水通道蛋白-2蛋白抗體IgG豚鼠集落激因子2受體α (CSF2Rα)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

銩標準溶液 1000μg/mlAnti-AQP-3/FITC  熒光素標記水通道蛋白-3抗體IgG豚鼠N-乙酰半糖-6-硫酯酶(GAS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

銩標準溶液 1000μg/mL，體：10%HCLAnti-AQP4/FITC  熒光素標記水通道蛋白-4蛋白抗體IgG豚鼠凝溶膠蛋白(GS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

釩標準溶液1 mg/ml V(3+),溶劑:2%硝,用于 AAS Anti-AQP5/FITC  熒光素標記水通道蛋白-5抗體IgG豚鼠腎素(REN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

釩標準溶液 1000μg/mlAnti-AQP7/FITC  熒光素標記水通道蛋白-7抗體IgG豚鼠骨成型蛋白4 (BMP-4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

釩標準溶液 500mg/L，溶劑：水Anti-AQP9/FITC  熒光素標記水通道蛋白-9抗體IgG豚鼠α-黑色素(αMSH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

釩標準溶液 100mg/L，體:1%HCI Anti-AR/FITC  熒光素標記雄受體抗體IgG豚鼠肌營養(yǎng)**蛋白(DMD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鐿標準溶液 1000μg/mlAnti-AKR1B1/ADR/FITC  熒光素標記糖還原酶抗體IgG豚鼠C4結合蛋白α(C4BPα)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鐿標準溶液 1000μg/ml in 10%HClAnti-phospho-AR ( p-Ser580)/FITC  熒光素標記化雄受體抗體IgG豚鼠核孔蛋白205kda(NUP205)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

釔標準溶液 1000μg/ml in 10% HClAnti-AR(phospho Ser213/Ser791)/FITC  熒光素標記化雄受體抗體IgG豚鼠殺性/通透性增加蛋白(BPI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

釔標準溶液 1000μg/mlAnti-AR Alpha1/FITC  熒光素標記α1腎上腺素能受體抗體IgG豚鼠胃粘液素(GM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鋅標準溶液 1000μg/mlAnti-ARC/FITC  熒光素標記ARC抗體IgG豚鼠環(huán)指蛋白4(RNF4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鋅標準溶液 1000mg/L，溶劑：1%鹽Anti-ARF6/FITC  熒光素標記ADP核糖化因子6抗體IgG豚鼠L-脫氫酶(L-LDH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
EJ細胞硫氧化還原蛋白Elisa試劑盒生長調(diào)節(jié)致癌因α/黑素瘤生激因子α 抗原KLHL3  Kelch樣蛋白3抗體

線粒體呼吸鏈復合物IElisa試劑盒葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗原（熱休克蛋白70蛋白5）KLHL26  Kelch樣蛋白26抗體

線粒體呼吸鏈復合物IIElisa試劑盒谷胱甘肽還原酶抗原KLHL25  Kelch樣蛋白25抗體

線粒體呼吸鏈復合物IIIElisa試劑盒A型人流感病H1N1-M2蛋白多肽KLHL24  Kelch樣蛋白24抗體

線粒體呼吸鏈復合物IVElisa試劑盒A型豬流感病H1N1-M2蛋白KLHL23  Kelch樣蛋白23抗體

總抗氧化能力Elisa試劑盒流感病A抗原KLHL22  Kelch樣蛋白22抗體

超氧陰離子Elisa試劑盒流感病A抗原KLHL21  Kelch樣蛋白21抗體

總蛋白酶Elisa試劑盒組蛋白H2AX多肽抗原KLHL20  Kelch樣蛋白20抗體

總蛋白酶Elisa試劑盒流感病A抗原KLHL14  Kelch樣蛋白14抗體