公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱：黑色素瘤細(xì)胞；A875
形態(tài)特性：多角形

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

特征特性：NGF受體陽(yáng)性。

培養(yǎng)條件：DMEM(高糖）+10%FBS

傳代方法：1:3傳代；3~4天1次。
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 

鈷標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L，溶劑：1%鹽Anti- Phospho-BAP1 (p-Ser592)(human) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人化癌易感因1抗體(人)IgG雞生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白14(Grb14)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

離子標(biāo)準(zhǔn)溶液500mg/L，溶劑：水Anti-Bassoon/BSN /FITC  熒光素標(biāo)記鋅指蛋白231抗體IgG雞球蛋白G Fc段低親和力受體IIIb(FcγR3B)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

色度標(biāo)準(zhǔn)溶液 500度，溶劑：1％HClAnti-Batroxobin/FITC  熒光素標(biāo)記蛇******巴***曲***酶***抗***體IgG雞趨化素樣因子超家族成員8(CKLFSF8)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

色度標(biāo)準(zhǔn)溶液 500度Anti-Bax protein/FITC  熒光素標(biāo)記 Bax 蛋白抗體IgG雞血紅蛋白H(HbH)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

色度標(biāo)準(zhǔn)溶液 500度，溶劑：10％HCl Anti-Bax/FITC  熒光素標(biāo)記Bax抗體IgG雞去唾液糖蛋白受體2(ASGR2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鄰硝標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：Anti-Bax(phospho Ser184) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠等化Bax抗體IgG雞鳥(niǎo)苷環(huán)化酶激活因子2A(GUCA2A)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

間酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：Anti-BBC3/PUMA /FITC  熒光素標(biāo)記p53正向凋亡調(diào)控因子抗體IgG雞血小板反應(yīng)蛋白4(TSP-4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

間酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.98mg/ml，體：Anti-BCHE/FITC  熒光素標(biāo)記丁酰膽堿脂酶抗體(N端)IgG雞半胱氨酰白三烯受體1(CYSLTR1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

間酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：Anti-BCHE/FITC  熒光素標(biāo)記丁酰膽堿脂酶抗體(C端)IgG雞游離血紅蛋白(f-Hb)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

鄰二酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：Anti-Bcl-2 protein/FITC  熒光素標(biāo)記 Bcl-2 蛋白抗體IgG雞原鈣黏素β16(PCDHβ16)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

水質(zhì)化學(xué)需氧量標(biāo)樣套裝濃度范圍49.4-208（mg/L）,分3個(gè)梯度: 94Anti-Bcl-xL/FITC  熒光素標(biāo)記抗Bcl-xL蛋白抗體IgG雞肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK/MYLK)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

化學(xué)需氧量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分析標(biāo)準(zhǔn)品,含水質(zhì)Anti-p-Bcl-xL(phospho-Ser62)/FITC  熒光素標(biāo)記抗化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗體IgG雞IV D組脂酶A2(PLA2G4D)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

水質(zhì)總化物標(biāo)樣 65.6ug/L，分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-Phospho-Bcl-2 (p-Thr56) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化Bcl-2抗體IgG雞周期素D2(CCND2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

濃度范圍:0.299-79.3(mg/L)，分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-Phospho-Bcl-2 (p-Ser70) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化Bcl-2抗體IgG雞異常凝血酶原(APT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

水質(zhì)電導(dǎo)率標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-Bcl-6/Bcl-5/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠原癌因Bcl-6抗體IgG雞血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
A875細(xì)胞氨環(huán)烷羧Elisa試劑盒HLA-DR抗原KIF5A/NKHC1  驅(qū)動(dòng)蛋白KIF5A抗體

異黃酮合成酶Elisa試劑盒人類白抗原EKIF4A  沉默驅(qū)動(dòng)蛋白KIF4A抗體

氫過(guò)氧化物裂解酶Elisa試劑盒高遷移率族蛋白A1抗原KIF3A  驅(qū)動(dòng)蛋白家族蛋白3抗體

酰轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒高遷移率族蛋白A2抗原KIF2B  有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣2B抗體

酰轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗原KIF20A/MKLP2  有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣2抗體

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗原KIF1B  驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員1B抗體

羧酯酶Elisa試劑盒血紅素氧合酶-2抗原KIF17  驅(qū)動(dòng)蛋白家族KIF17抗體

花生凝集素Elisa試劑盒異染色質(zhì)蛋白1(化多肽)KIF15  驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員15抗體

鈣離子ATP酶Elisa試劑盒異染色質(zhì)蛋白1（化多肽）Kif14 protein  驅(qū)動(dòng)蛋白家族Member14蛋白抗體