實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

產品名稱：滋養(yǎng)細胞；HTR-8
形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)條件：DMEM/F12+15%FBS

傳代方法：1：2傳代

公司細胞現(xiàn)貨供應，質量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
鄰二二異辛酯  標準溶液1000μg/ml，溶劑：Anti-Bim/FITC  熒光素標記死亡調解子抗體IgG雞脾臟酪氨激酶(SYK)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鄰二二異辛酯 標準溶液500μg/ml，溶劑：Anti-phospho-Bim(Ser55) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化死亡調解子抗體IgG雞胸腺嘧啶核苷化酶(TP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

中標樣 分析標準品Anti-Bim(phospho Ser87)/FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化死亡調解子抗體IgG雞GATA結合蛋白3(GATA3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2,4-二硝標準溶液 1000μg/ml,溶劑：Anti-phospho-Bim(Ser69) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化死亡調解子抗體IgG雞糖化脂酰肌特異性脂酶D1(GPLD1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

標準溶液 100μg/ml，溶劑：（劇品）Anti-BIRC5/FITC  熒光素標記凋亡抑制因子5抗體IgG雞IX型膠原α3 (COL9α3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

中標樣 分析標準品（劇品）Anti-CD203c/FITC  熒光素標記CD203c抗體IgG雞脂質運載蛋白2(LCN2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

異辛烷中o, p’-DDT標樣 標稱值單位：100μg/mL，分析標準品Anti-CD203c/RBITC  紅色熒光素羅丹明(RBITC)標記抗CD203c抗體IgG雞素β受體(LTβR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

異辛烷中p, p’-DDT標樣 濃度的標稱值單位：98ug/mL，分析標準品Anti-BNP/HRP  辣根過氧化物酶標記兔抗人腦鈉素抗體IgG雞糖抗原125(CA125)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

p, p’-DDD標準溶液101.5mg/L,溶劑:異辛烷Anti-CD31/HRP  辣根過氧化物酶標記CD31抗體IgG雞線粒體肌激酶1B(CKMT1B)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

2,3-二酚標準溶液 1000μg/ml,溶劑：Anti-BK channel/FITC  熒光素標記BK通道蛋白抗體IgG雞血小板衍生生長因子C(PDGFC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2,4-二酚標準溶液 1000μg/ml,溶劑：Anti-BKCa channels/FITC  熒光素標記鈣激活通道蛋白抗體IgG雞山梨脫氫酶(SDH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2,5-二酚標準溶液 1000μg/ml，溶劑：Anti-Bmi1/PCGF4/FITC  熒光素標記組蛋白相關Bmi1抗體IgG雞脂酰肌特異性脂酶Cγ2(PLCγ2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

3,4-二酚標準溶液 1000μg/ml,溶劑：Anti-BLAME/SLAMF8/FITC  熒光素標記BLAME抗體IgG雞單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

3,5-二酚標準溶液 1000μg/ml，溶劑：Anti-BLNK/B-cell linker protein /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠T連接蛋白抗體IgG雞外信號調節(jié)激酶(ERK)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鄰二二乙酯標準溶液 1000μg/ml，溶劑：Anti-Phospho-BLNK(p-Tyr96) /FITC  熒光素標記兔抗人化T連接蛋白抗體IgG雞活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
HTR-8/SVneo細胞脂肪去飽和酶Elisa試劑盒絲氨蛋白酶/線粒體絲氨蛋白酶多肽抗原Keratan Sulfate  硫角質素抗體

N-乙酰葡糖Elisa試劑盒離子鈣接頭蛋白抗原KEAP1/KLHL19  胞質接頭蛋白Keap1抗體

核酮糖激酶Elisa試劑盒小腸型脂肪結合蛋白抗原KDM5C/Jarid1C/SMCX  組蛋白去化Jarid1C抗體

神經酰Elisa試劑盒干擾素誘導跨膜蛋白1抗原KDM5B/PLU1/Jarid1B  組蛋白去化酶JARID1B抗體

神經鞘氨Elisa試劑盒干擾素-α抗原（人）KDM4C/GASC1/JMJD2C  鱗狀癌增強蛋白1抗體

1鞘氨Elisa試劑盒干擾素-gamma受體1抗原KDM1  組蛋白賴氨特異性脫酶1抗體

鞘脂Elisa試劑盒胰島素樣生長因子結合蛋白-2（多肽）KDEL (ER Marker)  賴氨，天冬氨，谷氨，亮氨相關序列抗體

酯酰ACP硫酯酶Elisa試劑盒胰島素樣生長因子結合蛋白-3抗原KCTD5  離子通道四聚體結構域蛋白5抗體

脂二酰甘油酰轉移酶Elisa試劑盒胰島素樣生長因子2 mRNA 結合蛋白3抗原KCTD12  離子通道多聚體結構域蛋白12抗體
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

產品留言

標題

聯(lián)系人

聯(lián)系電話

內容

驗證碼

點擊換一張

注：1.可以使用快捷鍵Alt+S或Ctrl+Enter發(fā)送信息!
2.如有必要,請您留下您的詳細聯(lián)系方式!