產品名稱：真皮微血管內皮細胞；HDMEC
培養(yǎng)條件：內皮細胞培養(yǎng)基，scienCA-ll

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凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

六標準溶液,52.6mg/L,溶劑:Anti-C5b-9/TCC/FITC  熒光素標記末端補體復合物C5b-9抗體IgG雞GDP解離抑制因子1(GDI1)酶聯吸附測定試劑盒

異辛烷中β-六六六標樣 濃度范圍:98.2(mg/L)，分析標準品Anti-CA125/FITC  熒光素標記卵巢癌抗原抗體IgG雞封閉蛋白1(CLDN1)酶聯吸附測定試劑盒

七標準溶液 100μg/ml，溶劑：（劇品）Anti-CA15-3/FITC  熒光素標記癌相關抗原抗體IgG雞錨蛋白B(Ank-B)酶聯吸附測定試劑盒

對二酚標準溶液 1000μg/ml，溶劑：Anti-phospho-c-Abl/v-abl(Tyr245) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化非受體酪氨激酶c-Abl抗體IgG雞胰腺癌標志物(CA242)酶聯吸附測定試劑盒

β-六六六標準溶液100μg/ml，溶劑：Anti-phospho-c Abl/v-abl(Tyr412) /FITC  熒光素標記兔抗人、大,小鼠化非受體酪氨激酶c-Abl抗體IgG雞α干擾素(IFN-α) 酶聯吸附測定試劑盒

β-六六六標準溶液 50.0μg/mL，體：:=4:1Anti-phospho-c-Abl/v-abl(Tyr204) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化非受體酪氨激酶c-Abl抗體IgG雞角蛋白13(CK-13/KRT13)酶聯吸附測定試劑盒  

β-六六六標準溶液 100μg/ml,u=3%Anti-phospho-c-Abl/v-abl(Thr735) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化非受體酪氨激酶c-Abl抗體IgG雞前動力蛋白受體2(PKR2)酶聯吸附測定試劑盒

β-六六六標準溶液 10μg/ml,u=6%Anti-phospho-c-Abl(Tyr89) /FITC  熒光素標記兔抗人、小鼠化非受體酪氨激酶c-Abl抗體IgG雞黏著斑激酶(FAK)酶聯吸附測定試劑盒

δ-六六六 分析標準品Anti-Phospho-HDAC3 (Ser424)/FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化組蛋白去乙酰化酶3抗體IgG雞β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)酶聯吸附測定試劑盒

δ-六六六標準溶液96.8mg/LAnti-CAD/CPAN/FITC  熒光素標記Caspase 激活的脫氧核糖核酶抗體IgG雞粒集落激因子受體(GCSFR)酶聯吸附測定試劑盒

δ-六六六標準溶液 100μg/ml，溶劑：Anti-CA I/FITC  熒光素標記碳酐酶1抗體IgG雞高分子量角蛋白(CK-HMW)酶聯吸附測定試劑盒

δ-六六六標準溶液 50μg/mL，體：:=4:1Anti-CA II /FITC  熒光素標記碳酐酶2抗體IgG雞接頭蛋白2(ELMO2)酶聯吸附測定試劑盒

δ-六六六標準溶液 100μg/ml,u=3%Anti-Calcineurin Alpha /PP-2B alpha 1 /FITC  熒光素標記蛋白酯酶-2B催化亞單位抗體IgG雞組織因子途徑抑制因子(TFPI)酶聯吸附測定試劑盒

δ-六六六標準溶液 10μg/ml,u=6%Anti-caldesmon/smooth muscle /FITC  熒光素標記鈣調結合蛋白/鈣調素結合蛋白抗體IgG雞血漿谷胱甘肽過氧化物酶(GPX3)酶聯吸附測定試劑盒

濃度范圍:10.0-30.0(mg/L)，分析標準品Anti-p-Caldesmon/FITC  熒光素標記化鈣介質素抗體IgG雞色素上皮衍生因子(PEDF)酶聯吸附測定試劑盒
HDMEC細胞棉籽糖Elisa試劑盒白介素-16抗原KCNG2  心臟離子通道蛋白亞2抗體

脫落抗體Elisa試劑盒白介素-18/干擾素γ誘導因子KCNE2  離子通道蛋白家族成員2抗體

脂質過氧化物Elisa試劑盒白介素-23受體抗原KCNE1L  離子通道蛋白家族成員1樣蛋白抗體

酪氨羥化酶Elisa試劑盒白介素1α抗原KCNE1  離子通道蛋白家族成員1抗體

色素C氧化酶Elisa試劑盒白介素2抗原（大、小鼠）KCND2/Kv4.2  電壓門控性通道蛋白Kv4.2抗體

鞘氨-1-Elisa試劑盒IL-2抗原（人）KCND1/Kv4.1  電壓門控通道Kv4.1抗體

鞘氨Elisa試劑盒白介素-23抗原KCNC4/KV3.4  離子通道蛋白Kv3.4抗體

堿性焦酶Elisa試劑盒白介素4抗原KCNC3/Kv3.3  離子通道蛋白Kv3.3抗體

氨解氨酶Elisa試劑盒白介素4抗原KCNC1  離子通道蛋白Kv3.1抗體