實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

產(chǎn)品名稱(chēng)：膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞；T24
形態(tài)特性：上皮樣

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

特征特性：該細(xì)胞源自一位81歲白人女性患者的膀胱移行細(xì)胞癌組織；來(lái)源于移行細(xì)胞癌病人的白血病和血漿對(duì)T24和相關(guān)細(xì)胞株有細(xì)胞毒性；倍增時(shí)間為19小時(shí)；含ras(H-ras)癌基因,表達(dá)腫瘤特有抗原。

培養(yǎng)條件：DMEM+10%FBS

傳代方法：1：2傳代

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 
標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mL，體:1%HClAnti-Aldolase A/FITC  熒光素標(biāo)記縮酶A抗體IgG豚鼠11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/mL，體:1%HCl Anti-ALK/CD246Ag /FITC  熒光素標(biāo)記間變型瘤激酶抗體IgG豚鼠粘蛋白5B(MUC5B)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-phospho-ALK/CD246(Tyr1586) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大鼠化間變型瘤激酶抗體IgG豚鼠滑行蛋白α(TXLNa)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L，溶劑：水Anti-ALK/CD246(phospho Tyr1278/1282/1283) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化間變型瘤激酶抗體IgG豚鼠甘露糖受體(MR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

標(biāo)準(zhǔn)溶液 體: 1％HClAnti-ALK/CD246(phospho Tyr1604) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化間變型瘤激酶抗體IgG豚鼠封閉蛋白3(CLDN3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鐠標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-ALR/FITC  熒光素標(biāo)記肝再生增強(qiáng)因子抗體IgG豚鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGF-AA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鐠標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mL，體：10%HClAnti-ALT1/GPT 1/FITC  熒光素標(biāo)記谷氨氨轉(zhuǎn)移酶1抗體IgG豚鼠5核苷酶(5-NT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-AMACR/P504S /FITC  熒光素標(biāo)記α－酰輔酶A消旋酶抗體IgG豚鼠白調(diào)節(jié)素(LR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

根標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-HADHSC (human)/FITC  熒光素標(biāo)記短鏈L-3羥烷輔酶A脫氫酶抗體（人）IgG豚鼠S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

釕標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-HADHSC (rat, mouse)/FITC  熒光素標(biāo)記短鏈L-3羥烷輔酶A脫氫酶抗體（大鼠，小鼠）IgG豚鼠α羥丁脫氫酶(αHBDH)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

銠標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-Amph/FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體IgG豚鼠髓系觸發(fā)受體-1(TREM-1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

銣標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-AMPK alpha-1 /FITC  熒光素標(biāo)記腺苷單活化蛋白激酶α1抗體IgG豚鼠血小板反應(yīng)蛋白2(TSP-2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

錸標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-AMPK alpha 2/FITC   熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠腺苷單活化蛋白激酶α2抗體IgG豚鼠上皮膜抗原(EMA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

二氧化硅標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-AMPK alpha-1(phospho Ser485+Ser491) /FITC  熒光素標(biāo)記化腺苷單活化蛋白激酶α1抗體IgG豚鼠內(nèi)皮蛋白C受體(EPCR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-AMPK beta-1(phospho Ser108) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化腺苷單活化蛋白激酶β1抗體IgG豚鼠長(zhǎng)效狀腺(LATS)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
T24細(xì)胞肉桂脫氫酶Elisa試劑盒促卵泡受體抗原KRAS  原癌因K-ras抗體

纖維素Elisa試劑盒促卵泡抗原KNTC1/Kinetochore  著絲點(diǎn)關(guān)聯(lián)蛋白1抗體

1,5-二核酮糖Elisa試劑盒γ1氨丁A型受體α1抗原KNL2/C14orf106  14號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框106抗體

生長(zhǎng)釋放肽Elisa試劑盒g(shù)-氨丁B1受體(多肽)KNDC1  腦蛋白9抗體

螯合肽Elisa試劑盒γ1氨丁A型受體B2抗原KMT8/Riz1/Riz2  轉(zhuǎn)錄因子GATA3結(jié)合蛋白G3B抗體

金屬忍耐蛋白Elisa試劑盒谷氨脫羧酶-67抗原KMT6/EZH2  抑癌蛋白EZH2抗體

類(lèi)粘蛋白Elisa試劑盒生長(zhǎng)抑制DNA損傷因153抗原KMT3B/NSD1/ARA267  組蛋白化KMT3B抗體（雄受體激活蛋白）

亞硫還原酶Elisa試劑盒化神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43抗原KMT1C/G9a  組蛋白H3賴(lài)氨9化1C抗體

腺苷-5-酰硫還原酶Elisa試劑盒3-甘油脫氫酶(人)抗原KMT1A/SUV39H1  組蛋白H3 K9轉(zhuǎn)移酶抗體
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。