公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱：永生化表皮細(xì)胞；HaCaT
形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：該細(xì)胞源自一位62歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚，角蛋白、角化細(xì)胞交聯(lián)外膜蛋白、中間絲相關(guān)蛋白陽性。

培養(yǎng)條件：DMEM+10%FBS

傳代方法：1:3～1:6傳代，每周換液2～3次
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5???1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

水質(zhì)鋰標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-Caspase-3 p17 subunit/FITC  熒光素標(biāo)記Caspase-3 p17 subunit蛋白抗體雞胰高血糖素樣肽1(GLP-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000mg/L，溶劑：1%硝Anti-caspase-3 p12 subunit /FITC  熒光素標(biāo)記活化半胱蛋白酶蛋白-3抗體IgG雞抗脂酰絲氨抗體(APSA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L，溶劑：1%硝Anti-Cystatin 3/CST3/FITC  熒光素標(biāo)記胱抑素C/半胱氨蛋白酶抑制劑C抗體IgG雞大腸癌專一抗原3(CCSA-3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

錳標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000mg/L，溶劑：1%硝Anti-Caspase-6 (CT)/FITC  熒光素標(biāo)記半胱蛋白酶蛋白-6抗體（C端）IgG雞外質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(EMMPRIN/CD147)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

錳標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L，溶劑：1%硝Anti-Caspase-6 (NT)/FITC  熒光素標(biāo)記半胱蛋白酶蛋白-6抗體(N端)IgG雞粒趨化蛋白2(GCP-2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

水質(zhì)錳標(biāo)樣 1.96mg/L in H2O，分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-Caspase-6 (NT)/FITC  熒光素標(biāo)記半胱蛋白酶蛋白-6抗體(N端)IgG雞平滑肌肌動蛋白α2(ACTα2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

水質(zhì)鉬標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-CASP4/FITC  熒光素標(biāo)記半胱蛋白酶蛋白-4抗體IgG雞促胃液素受體(GasR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鎂標(biāo)準(zhǔn)溶液0.197mg/L,用于水質(zhì)分析Anti-Caspase-8 /FITC  熒光素標(biāo)記半胱氨蛋白酶8抗體IgG雞二氫硫辛轉(zhuǎn)乙酰酶(DLAT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鎂標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L,溶劑：1%鹽Anti-FLASH/CASP8AP2/FITC  熒光素標(biāo)記半胱氨蛋白酶8相關(guān)蛋白2抗體IgG雞熱休克蛋白40(HSP-40)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

中標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-Caspase-9/FITC  熒光素標(biāo)記白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG雞I型前膠原羧端原肽(PICP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

標(biāo)準(zhǔn)溶液500μg/ml，溶劑：Anti-Caspase-9/FITC  熒光素標(biāo)記白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG雞信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子2(STAT2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

水質(zhì)汞標(biāo)樣 濃度范圍:6.14±0.42(ug/L)，分析標(biāo)準(zhǔn)品 Anti-Phospho-Caspase-9 (Pry153) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG雞上皮膜抗原(EMA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

汞標(biāo)準(zhǔn)溶液 100ml/L，溶劑：3%硝Anti-Caspase-10/FITC  熒光素標(biāo)記半胱蛋白酶-10抗體IgG雞周期素依賴性激酶2(CDK2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液 500 mg/L,溶劑:微量硫Anti-Caspase-12(hunman)/FITC  熒光素標(biāo)記半胱蛋白酶蛋白-12抗體(人)IgG雞轉(zhuǎn)運蛋白1(TNPO1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

汞標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml，溶劑：Anti-Caspase-12/FITC  熒光素標(biāo)記半胱蛋白酶蛋白-12抗體IgG雞周期素依賴性激酶9(CDK-9)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
HaCaT細(xì)胞色氨合成酶Elisa試劑盒抑制素βB抗原KATNA1/Katanin p60 A1  劍蛋白p60亞A1抗體

羧肽酶Elisa試劑盒整合素α3抗原katanin p80  劍蛋白p80抗體

植酶Elisa試劑盒整合素β5抗原KAT4  周期因1蛋白抗體

過氧化氫Elisa試劑盒整合素α1抗原KAT3B/Ep300  轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體

精合成酶Elisa試劑盒整合素α4β7抗原KAT2B/ GCN5/PCAF  組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶PCAF抗體

精氨脫羧酶Elisa試劑盒整合素αE2抗原KAT13D/CLOCK  生物鐘KAT13D蛋白抗體

鳥氨脫羧酶Elisa試劑盒ENPP3抗原KAT13A/SRC1  類固受體激活蛋白1抗體

S-腺苷蛋氨脫羧酶Elisa試劑盒支架蛋白抗原KARS2/Lysyl tRNA synthetase  賴氨tRNA的連接酶抗體

糖異構(gòu)酶Elisa試劑盒干擾素調(diào)節(jié)因子抗原Kappa-casein/CSN3  κ-酪蛋白抗體

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