公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱：皮膚成纖維細(xì)胞；mSk-FBCs-12
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 

釩標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L，溶劑：水Anti-CD31(PECAM-1)/PE  熒光素PE標(biāo)記血小板內(nèi)皮黏附分子-1抗體IgG雞補(bǔ)體1q(C1q)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

中揮發(fā)性鹵代烴混合標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-CD31(PECAM-1)/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記血小板內(nèi)皮黏附分子-1抗體IgG雞補(bǔ)體因子1R(Clr)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

中揮發(fā)性鹵代烴混合標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-CD31/FITC  熒光素標(biāo)記血小板內(nèi)皮黏附分子-1抗體IgG雞抗心脂抗體IgA(ACA-IgA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

中揮發(fā)性有機(jī)物混合標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品 Anti-CD33/Siglec-3/FITC  熒光素標(biāo)記抗CD33抗體IgG雞骨成型蛋白4 (BMP-4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

水質(zhì)總堿度標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-CD33/FITC  熒光素標(biāo)記抗CD33抗體IgG雞谷氨脫氫酶(GDH/GLDH)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

水質(zhì)濁度標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-CD33L/OBBP1/FITC  熒光素標(biāo)記兔CD33L抗體IgG雞二氧化酶(DAO)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

對(duì)二標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：二硫化碳Anti-CD34/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、兔、牛、豬、犬CD34抗體IgG雞質(zhì)金屬蛋白酶25(MMP-25)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

對(duì)二標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑： Anti-CD34(C-term) /FITC  熒光素標(biāo)記CD34抗體（表面的唾液粘蛋白）C端蛋白多肽IgG雞生長(zhǎng)分化因子5(GDF5)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

對(duì)二標(biāo)準(zhǔn)溶液1mg/ml,溶劑:Anti-Anti-CD44v10 /FITC   熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠CD44V10抗體IgG雞垂體腺苷環(huán)化酶激活肽受體 (PACAPR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

間二標(biāo)準(zhǔn)溶液1mg/ml,溶劑:,水質(zhì)分析Anti-CD34/PE  熒光素PE標(biāo)記CD34抗體（表面的唾液粘蛋白）IgG雞鳥(niǎo)苷交換因子(GEF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

鄰二 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-CR1/CD35/FITC  熒光素標(biāo)記Ⅰ型補(bǔ)體受體抗體（C3b/C4b受體抗體）IgG雞孕酮和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

間二標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：二硫化碳Anti-CD36/FITC  熒光素標(biāo)記CD36抗體IgG雞核孔蛋白214kda(NUP214)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

間二標(biāo)準(zhǔn)溶液1000μg/ml，溶劑： Anti-CD38(human)/FITC  熒光素標(biāo)記抗CD38抗體（人）IgG雞XC趨化因子受體1(XCR1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

間二標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mg/ml,溶劑:Anti-CD38(mouse, rat)/FITC  熒光素標(biāo)記抗CD38抗體（小鼠、大鼠）IgG雞拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子(AATF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鄰二標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：二硫化碳Anti-CD40L /FITC  熒光素標(biāo)記抗CD40L抗體IgG雞多巴轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
mSk-FBCs-12細(xì)胞ω-3脂肪去飽和酶Elisa試劑盒黑皮質(zhì)素-1受體抗原IRX4  Iroquois同源蛋白4抗體

單尿苷Elisa試劑盒髓樣白血病-1抗原IRS-4  胰島素受體底物-4抗體

三尿苷Elisa試劑盒多藥耐藥蛋白抗原IRS-3  胰島素受體底物-3抗體

三鳥(niǎo)苷Elisa試劑盒肌增強(qiáng)因子2抗原IRS-2  胰島素受體底物-2抗體

胞苷三Elisa試劑盒線粒體融合蛋白1IRS1  胰島素受體底物-1抗體

木質(zhì)化病Elisa試劑盒金屬硫蛋白抗原IRS P53  胰島素受體底物p53蛋白抗體

顆粒結(jié)合型淀粉合成酶Elisa試劑盒層粘連蛋白受體1抗體Iroquois homeobox protein 3  Irx3蛋白抗體

吡咯啉羧還原酶Elisa試劑盒層粘連蛋白受體1抗原（C端）IRGM  相關(guān)鳥(niǎo)苷三酶因抗體

輔酶IElisa試劑盒中期因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子抗原IRF7  干擾素調(diào)節(jié)因子7抗體