實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

產(chǎn)品名稱：前列腺癌細(xì)胞；PCS-3
形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長，并可懸浮生長

特征特性：PCS-3源于一位62???白人男性IV級前列腺腺癌患者的骨轉(zhuǎn)移灶；有低水平的酸性磷酸酶活性和5-α-睪酮還原酶活性。

培養(yǎng)條件：F12K+10%FBS

傳代方法：消化CQ-5分鐘，1:2,3天內(nèi)可長滿

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
氧化鋁 99．99%，鍍膜Anti-CD44/PE  熒光素PE標(biāo)記CD44抗體IgG雞富含半胱氨蛋白61(Cyr61)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氧化鋁G TLCAnti-CD45/PE  熒光素PE標(biāo)記兔抗人、小鼠CD45抗體IgG雞胃粘液素(GM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

二氫銨 CP，98.5%Anti-CD133/Biotin  生物素化造血干抗原CD133抗體雞白分化抗原28(CD28)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氫二銨 CP,98.0%Anti-CD55/DAF/FITC  熒光素標(biāo)記衰變加速因子CD55抗體IgG雞狀旁腺受體2(PTHR2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氟化鋇  99.9% metals basisAnti-CD56/FITC  熒光素標(biāo)記CD56抗體IgG雞重組激活因1(RAG-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氟化鋇 AR,99.0%Anti-CD56/NCAM1/FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)粘附分子1抗體IgG雞雙腎上腺皮質(zhì)(DCX)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氟化鋇 99.99% metals basis,10μmAnti-CD57/FITC  熒光素標(biāo)記抗CD57抗體IgG雞晶體蛋白(CLC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氟化鋇 99.999% metals basisAnti-CD58/LFA-3/FITC  熒光素標(biāo)記功能相關(guān)抗原-3抗體IgG雞前列腺特異性抗原(PSA/KLK3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氫鍶 熒光級，99%Anti-CD59/FITC  熒光素標(biāo)記反應(yīng)性溶血膜抑制蛋白抗體IgG雞嗜鉻蛋白A/胰抑制素(CgA/Pancreastatin)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

氫鍶 99.98% metals basisAnti-CD62L/FITC  熒光素標(biāo)記L選擇素抗體IgG雞解整合素金屬蛋白酶9(ADAM9)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

硫亞銅 99%Anti-CD63/MLA1 /FITC  熒光素標(biāo)記抗溶酶體膜糖蛋白抗體IgG雞外質(zhì)蛋白1(ECM1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

硫 CP,98%Anti-CD63/MLA1 /RBITC  紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記抗溶酶體膜糖蛋白抗體IgG雞表面膜球蛋白D(mIgD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

硫鈉 AR，98.5%Anti-CD66a/Cea-1/CEACAM1/FITC  熒光素標(biāo)記癌胚抗原相關(guān)粘附分子1抗體IgG雞VI型膠原(COL6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

無水化鋁 CP,≥99.0%Anti-CD67/CEAcam8/FITC  熒光素標(biāo)記整合素樣癌胚抗原相關(guān)粘附分子8抗體IgG雞骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

丁酮肟 99%Anti-CD68/FITC  熒光素標(biāo)記CD68抗體IgG雞胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酶(CAD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
PCS-3細(xì)胞鐵氧原蛋白Elisa試劑盒質(zhì)金屬蛋白酶-9抗原IQCG  IQCG蛋白抗體

異戊二烯合成酶Elisa試劑盒質(zhì)金屬蛋白酶-10抗原IQCF1  IQCF1蛋白抗體

單萜烯合成酶Elisa試劑盒髓過氧化物酶抗原IQCE  IQCE蛋白抗體

脂酰絲氨合酶1Elisa試劑盒多藥耐藥相關(guān)蛋白2IQCD  IQCD蛋白抗體

脂酰絲氨Elisa試劑盒多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗原IQCC  IQCC蛋白抗體

葫蘆二烯合酶Elisa試劑盒線粒體核糖體蛋白L28(抗原)IQCA1  IQCA1蛋白抗體

脂肪酶Elisa試劑盒錯配修復(fù)蛋白1抗原Involucrin  囊包蛋白/內(nèi)披蛋白抗體

木葡聚糖內(nèi)糖轉(zhuǎn)酶水解酶Elisa試劑盒胃粘液素抗原INTS3  集成復(fù)雜蛋白亞單位3抗體

糖原合成激酶Elisa試劑盒褪黑素受體1B抗原Intra Acrosomal Protein/SP10  頂端體蛋白10抗體
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

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