產(chǎn)品名稱：前列腺癌細(xì)胞；DU145
形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：DU145是從一位有3年細(xì)胞白血病史的前列腺癌患者的腦部轉(zhuǎn)移灶中建立的。該細(xì)胞系未檢測到敏感性，酸性磷酸酶陽性，單個的細(xì)胞可在軟瓊脂中形成集落。對此細(xì)胞和原始腫瘤的亞顯微結(jié)構(gòu)分析可見微絨毛、微絲、細(xì)胞橋粒、線粒體、發(fā)達的高爾基體和異質(zhì)溶酶體。該細(xì)胞不表達前列腺抗原。

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法：1:3傳代，2-3天換液一次

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

啉 ACS, ≥99.0%Anti-CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor /RBITC  紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記CD105/轉(zhuǎn)化生長因子β受體抗體IgG雞糖原合成酶激酶3α(GSK3α)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

啉 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.5% (GC)Anti-CD107a/LAMP-1/FITC  熒光素標(biāo)記溶酶體相關(guān)膜蛋白1抗體IgG雞顆粒體蛋白(GRN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

啉 CP,98%Anti-CD107a/LAMP-1/PE  熒光素PE標(biāo)記溶酶體相關(guān)膜蛋白1抗體IgG雞腺苷環(huán)化酶3(ADCY3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

啉 AR,99%Anti-nectin 2/CD112/FITC  熒光素標(biāo)記黏附分子CD112抗體IgG雞煙酰腺嘌呤二核苷氧化酶4(NOX4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

啉 Standard for GC，≥99.5% (GC)Anti-CD117/FITC  熒光素標(biāo)記CD117抗體IgG雞谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶α5(GSTα5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

聚乙烯1797型 解度：96.0～98.0%(mol/mol)Anti-CD133 Anti-gen/FITC  熒光素標(biāo)記造血干抗原CD133抗體IgG雞白介素2受體β(IL-2Rβ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

聚乙烯1788低粘度型 解度：87.0～89.0(mol/mol)，CPS：4.6-5Anti-OX40/CD134/TNFRSF4/FITC  熒光素標(biāo)記CD134抗體IgG雞白介素16(IL-16)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

烯酰 AR,99.0%Anti-IL-7Ra/CD127/PE   熒光素PE標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、馬、兔白介素-7受體a抗體IgG雞球蛋白M(IgM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

烯酰 98% Anti-CD137/TNFRSF9/FITC  熒光素標(biāo)記CD137抗體IgG雞功能相關(guān)抗原2(LFA-2/CD2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

N-羥烯酰 98%Anti-CD133 antigen/PE  熒光素藻紅蛋白標(biāo)記兔抗人、大、小鼠和果蠅CD133抗體IgG雞嗜鉻蛋白B(CgB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

對二 99%Anti-HVEM/TNFRSF14/FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子受體超家族成員14抗體IgG雞胎盤堿性酶(PLAP/ALPP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三 97%Anti-Syndecan-1/CD138/FITC  熒光素標(biāo)記多配體聚糖抗體IgG雞Apelin 36(AP36)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三乙二 75℃＋＋＋Anti-CD141/FITC  熒光素標(biāo)記凝血調(diào)節(jié)蛋白抗體IgG雞蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M2(M-AChRM2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三乙二 CPAnti-VE-cadherin/CD144/VECD/FITC  熒光素標(biāo)記上皮型鈣粘附分子/血管內(nèi)皮鈣粘蛋白抗體IgG雞球蛋白G3(IgG3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三乙二 99%Anti-CD146(MCAN)/FITC  熒光素標(biāo)記抗黑色素瘤粘付分子CD146抗體IgG雞TATA框結(jié)合蛋白/TBP相關(guān)因子(TAF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
DU145細(xì)胞脂肪去飽和酶2Elisa試劑盒納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白：納曲酮偶聯(lián)血藍(lán)蛋白Integrin alpha V/CD51  整合素αV抗體

L-谷氨Elisa試劑盒核小體組裝蛋白1（多肽）Integrin Alpha V + Beta1  整合素αVβ1抗體

奎寧肉桂羥化轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒N-鈣粘附分子抗原Integrin Alpha V + Beta 6  整合素αVβ6抗體

還原型谷胱甘肽酶Elisa試劑盒E-鈣粘附分子抗原Integrin Alpha V + Beta 5  整合素αVβ5抗體

脫羧酶Elisa試劑盒去氧腎上腺素Integrin Alpha V + Beta 3 (CD51+CD61)  整合素αVβ3抗體

淀粉脫支酶Elisa試劑盒神經(jīng)粘蛋白抗原Integrin Alpha V  整合素αV抗體

半胱氨蛋白酶Elisa試劑盒2型神經(jīng)纖維瘤抗原Integrin alpha L/CD11a  整合素αL抗體

a_1,4葡聚糖轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒活化T核因子1蛋白Integrin alpha E2  整合素alpha E2 抗體

色素氧化酶Elisa試劑盒化核因子/化k因結(jié)合核因子抗原Integrin alpha E/CD103  整合素αE抗體