公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法：1：2傳代
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的??子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

硫鈉 CP，98%Anti-CD170/Siglec-5/FITC  熒光素標(biāo)記唾液結(jié)合性球蛋白樣凝集素5抗體IgG雞外生骨疣蛋白1(EXT1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

肌 99%Anti-Sialic14/FITC  熒光素標(biāo)記唾液結(jié)合性球蛋白樣凝集素14抗體IgG雞血管活性腸肽受體1(VIPR1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

位己內(nèi)酯  99%Anti-CD177/FITC  熒光素標(biāo)記CD177抗體IgG雞白分化抗原CD99(CD99)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

丁位癸內(nèi)酯 98%Anti-CD184/CXC-R4/FITC  熒光素標(biāo)記表面趨化因子受體4抗體IgG雞抑制蛋白β2(ARRβ2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

丁位癸內(nèi)酯 ≥98%, FCCAnti-CD226/DNAM-1/FITC  熒光素標(biāo)記CD226抗體IgG雞二肽肽酶X (DPP10)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

丁位癸內(nèi)酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98% (GC)Anti-CD229/SLAMF3/FITC  熒光素標(biāo)記CD229抗體IgG雞Smad同源物4 (Smad4/MADH4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

位癸內(nèi)酯 98%Anti-CD244/NKR2B4/SLAMF4/FITC  熒光素標(biāo)記CD244抗體IgG雞補(bǔ)體因子H(CFH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

位癸內(nèi)酯 ≥98%, FCC, FGAnti-TNFRSF13B/TNFRSF14B/TACI/FITC   熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子受體超家族成員13B抗體IgG雞腫瘤壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子(TWEAK)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

位十二內(nèi)酯  98%Anti-CD272/BTLA/FITC  熒光素標(biāo)記B和T衰減蛋白抗體IgG雞鞘脂脂質(zhì)蛋白1(PLP1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

位十二內(nèi)酯  分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5% (GC)Anti-Cdc2 p34/FITC  熒光素標(biāo)記周期素依賴性蛋白激酶p34抗體IgG雞鈣敏感受體(CaSR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

位十二內(nèi)酯  98%, FCC, KosherAnti-Phospho-cdc2 (Thr14)/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化周期素依賴激酶1抗體IgG雞乙酰膽堿受體抗體(AChRab)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

十二  98%Anti-Phospho-cdc2 (Tyr15) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化周期素依賴激酶1抗體IgG雞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號1(ERN1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

丁位十二內(nèi)酯 98%Anti-Cdc6/FITC  熒光素標(biāo)記分裂周期蛋白6抗體IgG雞轉(zhuǎn)狀腺素蛋白(TTR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

位庚內(nèi)酯  98%Anti-Phospho-cdc25C (Ser216) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化分裂周期蛋白25抗體IgG雞集落激因子(CSF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

位庚內(nèi)酯  ≥98%, FCC, KosherAnti-cdc25A /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠分裂周期蛋白25抗體IgG雞P62抗體(AP62A)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Tsu-Pr1細(xì)胞1-氨-1-羧環(huán)烷Elisa試劑盒軸索過度生長抑制因子-B/A抗原Integrin alpha 1/CD49a  整合素α1抗體

吲哚乙氧化酶Elisa試劑盒一氧化氮合成酶-2多肽抗原Insulin(1G11)  重組人胰島素單克隆抗體

維生素DElisa試劑盒跨膜受體蛋白Notch-1抗原Insulin(1D4:)  豬胰島素單克隆抗體

β－硫代葡萄糖苷水解酶Elisa試劑盒還原型輔酶Ⅱ抗原Insulin Receptor/CD220  胰島素受體抗體

色素P450Elisa試劑盒促尿鈉排泄肽前體C抗原Insulin Receptor R  胰島素受體相關(guān)受體抗體

絲裂原活化蛋白激酶20Elisa試劑盒神經(jīng)肽Y受體2（多肽）Insulin Receptor Beta  胰島素受體β抗體

原卟啉原氧化酶Elisa試劑盒神經(jīng)肽Y1受體抗原Insulin Receptor alpha  胰島素受體α抗體

查爾酮還原酶Elisa試劑盒醌氧化還原酶抗原Insulin Receptor Alpha  胰島素受體α抗體

4CL-肉桂4-羥化酶Elisa試劑盒谷氨受體1（多肽）Insulin  胰島素抗體

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