產(chǎn)品名稱：食管癌細胞；CaES-17
形態(tài)特性：上皮細胞樣

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)條件：DMEM（高糖）+10%FBS

傳代方法：1:2傳代

公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

(1R,2R)-(-)-N,N'-二環(huán)己烷-1,2-二  ≥97.0% (GC)Anti-FADD/FITC  熒光素標(biāo)記Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體IgG雞組織蛋白酶L(CTSL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

乙酰酮釕(III) 97%Anti-Phospho-FADD (Ser191) Mouse Specific /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗小鼠化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體IgG雞促腎上皮質(zhì)釋放(CRH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

(R,R)-(-)-1,2-雙[(鄰氧)()膦]乙烷(1,5-環(huán)辛二烯)Anti-Phospho-FGF Receptor 1 (Tyr766) /FITC  熒光素標(biāo)記化堿性成纖維生長因子受體1抗體IgG雞發(fā)動蛋白2(DNM2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三乙酰酮銠(III) 97%Anti-P-FADD/FITC  熒光素標(biāo)記化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體IgG雞BCL2相關(guān)死亡促進因子因子(BAD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三乙酰酮銠(III) 99.99% metals basisAnti-FAF1/FITC  熒光素標(biāo)記Fas相關(guān)1因子抗體IgG雞葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3(GLUT3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三銠二聚體 99%Anti-FAK/FITC  熒光素標(biāo)記粘著斑激酶抗體雞膜輔蛋白(MCP/CD46)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

(S)-(+)-N,N-二-1-(2-聯(lián)膦）二茂鐵乙 97%Anti-FAK2/Pyk2/FITC  熒光素標(biāo)記富含脯氨的酪氨激酶2抗體IgG雞不均一核糖核蛋白A2/B1 (HNRPA2B1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

化鏑(III) 99.9%，無水級，充氬封裝Anti-phospho-Pyk2 (Tyr402)/FITC  熒光素標(biāo)記化富含脯氨的酪氨激酶2抗體IgG雞抗II型膠原抗體(Anti-CIIAb)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

(S,S)-雙[(2-氧)]乙烷 97%Anti-phospho-Pyk2 (Tyr881) /FITC  熒光素標(biāo)記化富含脯氨的酪氨激酶2抗體IgG雞白分化抗原CD30(CD30)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

(S)-(-)-2, 2-雙（二對膦）-1,1-二聯(lián)萘 98%Anti-FAM3A/FITC  熒光素標(biāo)記胰腺衍生因子抗體IgG雞富含半胱氨型性蛋白(SPARC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

 (S)-聯(lián)萘(3,5-二)膦 98%Anti-FAM3B/PANDER /FITC  熒光素標(biāo)記胰腺衍生因子抗體IgG雞抗?fàn)钕偾虻鞍卓贵w(ATGA/TGAB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

(S,S)-DACH-特羅斯特配體 95%Anti-FANCD2/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠FANCD2抗體IgG雞P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-GP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

 (S)-N,N-二-1-[(R)-1',2-雙(二膦)二茂鐵]乙 95%Anti-FANCD2(phospho Ser222) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化FANCD2抗體IgG雞核因子相關(guān)κB結(jié)合蛋白 (NFRκB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

(S)-(-)-2-[2-(二膦)]-4-異-2-唑啉 98%Anti-FANCF/FITC  熒光素標(biāo)記范可尼貧血相關(guān)蛋白F抗體IgG雞S100鈣結(jié)合蛋白B (S100B)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

(S)-(+)-薄荷腦二膦  98%Anti-FAS/FITC  熒光素標(biāo)記FAS蛋白抗體IgG雞血管緊張素II受體2抗體(ANGⅡR2-Ab)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  
CaES-17細胞銨轉(zhuǎn)運蛋白Elisa試劑盒前列腺素氧化環(huán)化酶2(抗原)HSP58/Cornulin  熱休克蛋白58抗體

乙酰輔酶AElisa試劑盒C-藻藍素(藻藍蛋白)HSP47  熱休克蛋白-47抗體

黃花葉病Elisa試劑盒結(jié)締組織生長因子(多肽抗原)HSP27/HspB1/HSP25  熱休克蛋白27抗體

花果病Elisa試劑盒周期素E/原癌因抗原HSP22  熱休克蛋白-22抗體

單半糖甘油二酯Elisa試劑盒DNA轉(zhuǎn)移酶-3α(抗原)HSP20  熱休克蛋白-20抗體

前列腺素F2aElisa試劑盒周期素 C(抗原)HSP105  熱休克蛋白105抗體

前列腺素EElisa試劑盒降鈣素因相關(guān)肽HSP10/CPN10  熱休克蛋白10抗體

兒茶素Elisa試劑盒HSP1/Protamine P1  魚精蛋白P1抗體

PRAC蛋白Elisa試劑盒色素P450單氧化酶(多肽抗原)HSL/LIPE  敏感脂肪酶抗體

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