公司細胞現貨供應,質量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產品名稱
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規(guī)格
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貨號
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HEK-293細胞
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T25
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FS-X3436
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產品名稱:胚腎細胞;HEK-293
形態(tài)特性:上皮樣
生長特性:貼壁生長
特征特性:早期報道中指出該細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側端和右側端的DNA,但是現在明確了只存在其左側端的DNA。經過對Ad5的插入點的克隆測序發(fā)現,Ad5的1~4344位線性核苷酸整合入細胞染色體19q13.2。該細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主??杀磉_異常的玻連蛋白的細胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。生物**級別為2級。
培養(yǎng)條件:DMEM(高糖)+10%FBS
傳代方法:1:2傳代
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu),可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
右旋龍腦 98%Anti-DcR1/TRAIL-R3/TRID/LIT 熒光素標記DcR1抗體IgG雞纖維蛋白原γ(FGγ)酶聯吸附測定試劑盒
右旋龍腦 分析標準品,用于萜烯分析Anti-HBME-1 /FITC 熒光素標記間質HBME1蛋白抗體IgG雞43KDa Tar DNA結合蛋白(TDP43)酶聯吸附測定試劑盒
松香 75%Anti-DcR2/CD264 /FITC 熒光素標記抗誘捕受體2抗體IgG雞卵泡受體(FSHR)酶聯吸附測定試劑盒
β-蒎烯 98%Anti-DcR3/FITC 熒光素標記抗誘捕受體3抗體IgG雞煙酰腺嘌呤二核苷氧化酶1(NOX1)酶聯吸附測定試劑盒
α-蒎烯 98%Anti-HBV/pre S1/S2 protein /FITC 熒光素標記抗乙肝病pre S1/乙肝病pre S2抗體IgG雞Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)酶聯吸附測定試劑盒
松節(jié)油 ARAnti-HCCR-1/FITC 熒光素標記人因/bri3結合蛋白抗體IgG雞絲裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)酶聯吸附測定試劑盒
碳鎘 AR,98%Anti- Alpha-HCG/FITC 熒光素標記α亞人絨毛膜促性腺抗體IgG雞嗜性白血球相關之RNA水解酵素家族成員12(EAR12)酶聯吸附測定試劑盒
醌 GRAnti- Beta-HCG /FITC 熒光素標記抗人beta亞人絨毛膜促性腺抗體 IgG雞不均一核糖核蛋白U (HNRPU)酶聯吸附測定試劑盒
醌 98%Anti-HCFHrp/BTA/FITC 熒光素標記抗膀胱腫瘤抗原IgG雞催產素受體(OTR)酶聯吸附測定試劑盒
環(huán)戊乙 98%Anti-Hck/FITC 熒光素標記造血激酶抗體IgG雞抗載脂蛋白A1抗體(Apo A1-Ab)酶聯吸附測定試劑盒
1-溴-2-萘酚 98%Anti-HCMV PP65/HHV5 PP65/FITC 熒光素標記人巨病PP65/CMV低質脂蛋白抗體IgG雞腎上腺素能α1A受體(ADRA1A)酶聯吸附測定試劑盒
環(huán)戊乙 98%Anti-HCMV UL23/HHV5 UL23/FITC 熒光素標記人巨病UL23抗體IgG雞載脂蛋白A2(ApoA2)酶聯吸附測定試劑盒
環(huán)戊乙 97%Anti-HCMV UL49/FITC 熒光素標記人巨病UL49抗體IgG雞過氧化還原酶5(PRDX5)酶聯吸附測定試劑盒
內消旋-2,3-二巰丁二 98%Anti-HCN4/FITC 熒光素標記環(huán)化核苷調控陽離子通道蛋白亞型4IgG雞β1連接素(CTNNβ1)酶聯吸附測定試劑盒
硫代蘋果 98%Anti-HCV-Core/FITC 熒光素標記型肝炎病-C區(qū)抗體IgG雞肟前列腺素D2(PGD2-MOX)酶聯吸附測定試劑盒
HEK-293細胞色素P4501A1Elisa試劑盒核糖核蛋白抗原RO/SSA(抗原)Histone H3 (Di Methyl K4) 二化組蛋白H3K4抗體
焦酶Elisa試劑盒干燥癥SSB/La蛋白Histone H3 (Di Methyl K36) 二化組蛋白H3抗體
赤霉素3-氧化酶Elisa試劑盒Smad 2(抗原)Histone H3 (Di Methyl K27) 化組蛋白H3抗體
脂酶A1Elisa試劑盒相關抗原5(多肽抗原)Histone H3 組蛋白H3抗體
蔗糖合成酶Elisa試劑盒肺表面活性蛋白A(抗原)Histone H2B 組蛋白H2B抗體
蘋果褪綠葉斑病Elisa試劑盒滑膜凋亡抑制物1(抗體)Histone H2A.Z/ H2AFZ 組蛋白H2AZ抗體
蘋果莖痘病Elisa試劑盒非受體型酪氨激酶(抗原)Histone H2A.x 組蛋白H2AX抗體
谷氨酰合成酶Elisa試劑盒微管相關蛋白(抗原)Histone H2A 組蛋白H2A抗體
百香果斑駁病Elisa試劑盒CD90Histone H1 組蛋白H1抗體