產品名稱：馬-達二氏犬腎細胞系；MDCK(NBL-2)
形態(tài)特性：上皮樣；多角

生長特性：貼壁生長

特征特性：1958年，MadinSH和DarbyNB從表觀正常的成年雌性科克獵犬的腎建立了MDCK細胞株。角蛋白陽性。該細胞曾被用于研究β淀粉前體蛋白的形成及其蛋白水解產物的分類

培養(yǎng)條件：DMEM(高糖）+10%FBS

傳代方法：1:2~1:6傳代；2~3天換液1次。

公司細胞現(xiàn)貨供應，質量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

2-并噻唑 98%Anti-Phospho-Histone H3 (Ser28) /FITC  熒光素標記化組蛋白3抗體IgG雞成纖維生長因子結合蛋白1(FGFBP1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

4-氧硫代酰 98%Anti-Phospho-Histone H3 (Thr11)/FITC  熒光素標記化組蛋白3抗體IgG雞球蛋白G2(IgG2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

3-氧酚 97%Anti-Phospho-Histone H3 (Thr3)/FITC  熒光素標記化組蛋白3抗體IgG雞和肽素(CPP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-硝二硫 98%Anti-Histone H1.4 (phospho Thr18) /FITC  熒光素標記抗化乙酰化組蛋白H1b抗體IgG雞胰島素樣生長因子結合蛋白5(IGFBP-5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-噻吩乙酰 98%Anti-HisX6/FITC  熒光素標記聚組氨抗體/抗His tag標簽抗體IgG雞III型膠原α1(COL3α1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

乙烯硫 98%Anti-HIV gp41/FITC  熒光素標記艾滋病病抗體IgG雞胱天蛋白酶14(CASP14)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

二二硫 99%Anti-HIV gp120/FITC  熒光素標記艾滋病病抗體IgG雞SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

S-硫代乙酯 98%Anti-HIV-1 ENV (gp160) antigen/FITC  熒光素標記艾滋病病-1包膜糖蛋白抗體IgG雞受蛋白(PLN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

噻蒽 98%Anti-HIV-1 ENV (gp160) antigen/FITC  熒光素標記艾滋病病-1包膜糖蛋白抗體IgG雞可溶性血管內皮蛋白C受體(sEPCR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

4,4'-硫代雙硫酚 98%Anti-HisX6/6His/His tag(CT) /FITC  熒光素標記聚組氨抗體/抗His tag（C端）標簽抗體IgG雞葡萄糖激酶(GCK)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

硫代水楊 99%Anti-HisX6/6His/His tag(CT)/HRP  辣根過氧化物酶標記聚組氨抗體/抗His tag標簽抗體（C端）IgG雞前列腺素F(PGF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2,2'-硫代二乙 98%Anti-HLA-DR/FITC  熒光素標記HLA-DR抗原抗體IgG雞血小板衍生生長因子受體β(PDGFRβ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

4,4'-二亞砜  97%Anti-HLA-E/FITC  熒光素標記人類白抗原EIgG雞表皮調節(jié)素(EREG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

硫 99%Anti-HLA-G/FITC  熒光素標記人類白抗原G/組織相容性白抗原G抗體IgG雞T急性母白血病相關抗原(TALLA-1/CD231)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

對硫酚 99%Anti-HMGA1/FITC  熒光素標記高遷移率族蛋白A1抗體IgG雞成纖維生長因子7(FGF7/KGF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
MDCK(NBL-2)細胞甘露糖變位酶2Elisa試劑盒促腎上腺皮質(1-39)HHV4/CMV  人類巨病抗體

K+-ATPaseElisa試劑盒脂聯(lián)素（多肽抗原）HHLA2  HHLA2蛋白抗體

線粒體解偶聯(lián)蛋白Elisa試劑盒乙酰輔酶A羧化酶HHEX/HMPH  同源盒蛋白PRH抗體

Snrk蛋白激酶家族成員2Elisa試劑盒堿性酶hHBrk1  微絲相關蛋白hHBrk1抗體

羥戊二單酰輔酶A還原酶Elisa試劑盒α1性糖蛋白1/類粘蛋白1hHb(H5A3)  人血紅蛋白單克隆抗體

螯合素Elisa試劑盒水通道蛋白-5抗原HGFA/HGF activator  肝生長因子激活蛋白抗體

果糖-1,6-二縮酶Elisa試劑盒糖尿病相關肽/胰島淀粉樣肽HGF  肝生長因子抗體

木葡聚糖轉移酶水解酶Elisa試劑盒β淀粉樣肽25-35/Aβ25-35/Amyloid β (25-35) (多肽)HFREP1/FGL1  肝源性纖維蛋白原相關蛋白1抗體

芳烴羥化酶Elisa試劑盒β淀粉樣肽 1-42 (C端多肽)HEY2  轉錄因子HEY2蛋白抗體