實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

產(chǎn)品名稱：羊膜細(xì)胞；HA
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法：消化CQ-5分鐘，1:2,3天內(nèi)可長(zhǎng)滿

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
硝鑭 99.9% metals basisAnti-IAA/FITC  熒光素標(biāo)記吲哚-3-乙抗體/植物生長(zhǎng)素單克隆抗體IgG雞心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白C(MYBPC3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

硫鐿,八水 99.9% REOAnti-IASPP/FITC  熒光素標(biāo)IASPP蛋白抗體IgG雞β肌動(dòng)蛋白(β-actin)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

3-酰烯乙酯 94%Anti-Iba-1/FITC  熒光素標(biāo)記離子鈣接頭蛋白抗體IgG雞癌胚抗原(CEA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

2，3-二巰磺鈉鹽 95%Anti-ICAD/FITC  熒光素標(biāo)記Caspase 激活的脫氧核糖核酶抑制劑抗體IgG雞色素P450家族成員1A1(CYP1A1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

二氧乙酯 97%Anti-ICAM-1(CD54)/FITC  熒光素標(biāo)記間粘附分子-1抗體IgG雞組織型纖溶酶原激活因子(tPA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

溴代炔 99%Anti-CD54/ICAM-1/Biotin  生物素標(biāo)記間粘附分子-1抗體IgG雞纖維膠凝蛋白1(FCN1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

金屬鋰粒 99.9% metals basisAnti-ICAM-3/CD50/FITC  熒光素標(biāo)記間粘附分子-3抗體IgG雞白介素15(IL-15)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

碳化鎢 粉末，99.9% metals basis, <10μmAnti-Icos/CD278/FITC  熒光素標(biāo)記誘導(dǎo)協(xié)同激分子CD278抗體IgG雞瘦素受體(LEPR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

碳化鎢 粉末，99.9% metals basis, ≤1μmAnti-ICOS-L/B7-H2/CD275/FITC  熒光素標(biāo)記誘導(dǎo)協(xié)同激分子配體CD275抗體IgG雞素相關(guān)蛋白A(CAPA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

鈷 99.99%Anti-IDE/FITC  熒光素標(biāo)記胰島素降解酶抗體IgG雞肌肉糖原化酶(PYGM)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

硫鈷，七水 AR，99.5%Anti-ID1/Inhibitor of DNA binding 1 /FITC  熒光素標(biāo)記DNA結(jié)合抑制因子1抗體IgG雞異體移植炎性因子1(AIF1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

硫鈷，七水 99.99% metals basisAnti-IDE/FITC  熒光素標(biāo)記胰島素降解酶抗體IgG雞生長(zhǎng)分化因子10(GDF10)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

化鈷 99.998% metals basisAnti-IFABP/FITC  熒光素標(biāo)記小腸型脂肪結(jié)合蛋白抗體IgG雞Pdgfa相關(guān)蛋白(PDAP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

硫鎳，七水 99.99% metals basisAnti-IFABP/FITC  熒光素標(biāo)記小腸型脂肪結(jié)合蛋白抗體IgG雞Salusin α蛋白(Salusin α)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鎳粉 99.99% metals basis，200目Anti-IFI16/p16 /FITC  熒光素標(biāo)記γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16抗體IgG雞腺苷三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2(ABCG2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
HA細(xì)胞甘油-3-酰轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒CD3 epsilon(抗原)Hemopexin/HPX  糖蛋白β-1B抗體

尿苷二葡萄糖脫氫酶Elisa試劑盒霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白Hemoglobin α  糖化血紅蛋白α抗體

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶Elisa試劑盒霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白Hemoglobin Beta  血紅蛋白β抗體

谷胱甘肽合成酶Elisa試劑盒干擾素誘導(dǎo)T趨化因子抗原Heme Oxygenase 1/HO-1  血紅素氧合酶 1/熱休克蛋白32抗體

谷氨?；D(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒組織蛋白酶Ghemagglutinin protein/H  麻疹病血凝素抗體

異戊烯轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒CD68（多肽抗原）HEF1  蛋白激酶底物相關(guān)蛋白抗體

GA20-氧化酶Elisa試劑盒膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶（抗原）HECA  HECA蛋白抗體

氨酰tRNA合成酶Elisa試劑盒高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原HEC1  癌高表達(dá)蛋白Hec1抗體

轉(zhuǎn)肽酶Elisa試劑盒柯薩奇病A16型聚蛋白3DHEBP2  Heme結(jié)合蛋白2抗體
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。