產(chǎn)品名稱：胚胎干細(xì)胞；mESCs-11

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

kerio mail郵箱服務(wù)器解決方案Anti-phospho-IGF1 Receptor (Tyr1161) /FITC  熒光素標(biāo)記化胰島素樣生長因子1受體抗體IgG雞β2糖蛋白(β2-GP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鈦鋇 粉末, <2 μm, 99.5% metals basisAnti-IGFBP-1/FITC  熒光素標(biāo)記胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-1抗體IgG雞鐵蛋白(FE)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鈦鈣 99.5% metals basis，粉末, 2 μmAnti-IGFBP-2/FITC  熒光素標(biāo)記胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-2抗體IgG雞蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鈦鉛 粉末, <2 μm, ≥99.5% metals basisAnti-IGFBP-3/FITC  熒光素標(biāo)記胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-3抗體IgG雞氧化低密度脂蛋白(OxLDL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鈦鎂 粉末, <2 μm, ≥99% metals basisAnti-IGFBP-4/IBP4/FITC  熒光素標(biāo)記胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-4抗體IgG雞腫瘤標(biāo)志物CA724(CA724)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鈦鍶 99.5% metals basis，粉末, 5 μmAnti-IGFBP-5/IBP5 /FITC  熒光素標(biāo)記胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-5抗體IgG雞肌紅蛋白(MYO)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

對磺酰 AR，99%Anti-IGSF8/CD3/FITC  熒光素標(biāo)記球蛋超家族成員8抗體IgG雞血小板因子3(PF3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

硫鋅,一水 Zn≥ 35.5%Anti-IKB Alpha/FITC  熒光素標(biāo)記KB抑制蛋白α抗體IgG雞腫瘤蛋白P53(TP53)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

3-溴-5-吡啶 97%Anti-IKB alpha(phospho S32 + S36)/FITC  熒光素標(biāo)記化KB抑制蛋白α抗體IgG雞補體1抑制因子(C1INH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

干冰,塊狀,146*88*20Anti-IKB Beta/FITC  熒光素標(biāo)記KB抑制蛋白β抗體IgG雞C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

密封圈 6050真空干燥箱Anti-phospho-IkB beta (Ser23)/FITC  熒光素標(biāo)記化KB抑制蛋白β抗體IgG雞接觸蛋白2(CNTN2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

1-氨海因鹽鹽 98%Anti-IL-1 Alpha /FITC  熒光素標(biāo)記白介素1α抗體IgG雞趨化因子CC受體8(CCR8)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

呋喃妥因 98%Anti-IL-1 Beta/FITC  熒光素標(biāo)記白介素1β抗體IgG雞白蛋白(ALB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三氧化二鎳 CPAnti-IL-1ra/FITC  熒光素標(biāo)記白介素-1受體拮抗劑抗體IgG雞骨保護素(OPG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

過氧化 96.5%Anti-IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、豬、牛、羊、犬白介素-1受體拮抗劑抗體IgG雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL/TNFSF10)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
mESCs-11細(xì)胞氨酶Elisa試劑盒多價重組人登革熱病診斷抗原HDLBP/vigilin  高密度脂蛋白結(jié)合蛋白抗體

氨酶Elisa試劑盒異常凝血酶原/脫-γ-羧凝血酶原抗原HDL/high density lipoprotein  高密度脂蛋白抗體

絲氨；蘇氨蛋白酶Elisa試劑盒腸道病71型/手足口病病抗原HDL/high density lipoprotein  高密度脂蛋白抗體

鳥苷激酶Elisa試劑盒重組人表皮生長因子HDL  高密度脂蛋白抗體

淀粉化酶Elisa試劑盒表皮生長因子多肽HDHD3  HDHD3蛋白抗體

Atxin-3蛋白Elisa試劑盒上皮粘附分子/表皮粘附分子HDHD2B/LHPP  HDHD2B蛋白抗體

脂酰乙-N-轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒上皮粘附分子/表皮粘附分子抗原HDHD2/IER3IP1  HDHD2蛋白抗體

5羥色Elisa試劑盒雌二偶聯(lián)牛血清白蛋白HDHD1  HDHD1蛋白抗體

乙酰膽堿Elisa試劑盒骨骼肌烯化酶多肽HDGF  肝癌衍生生長因子抗體（高遷移率族蛋白1樣蛋白2抗體）

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