公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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293FT細(xì)胞
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T25
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FS-X3448
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產(chǎn)品名稱:表達(dá)SV40T抗原胚腎上皮細(xì)胞;293FT
形態(tài)特性:圓形
生長特性:貼壁生長
特征特性:該細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)SV40大T抗原,并且促進(jìn)適病毒產(chǎn)物的產(chǎn)生。
培養(yǎng)條件:DMEM(HG)+500ug/mlG418+10%FBS
傳代方法:1:2傳代
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
5-氧-3-吡啶 97%Anti-phospho-IKK gamma (Ser31) /FITC 熒光素標(biāo)記化核因子κB激酶gamma抑制劑抗體IgG雞cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
三氧化鎢 99.99% metals basisAnti-phospho-IKK alpha (Thr23) /FITC 熒光素標(biāo)記化核因子κB激酶alpha抑制劑抗體IgG雞多巴受體D2(D2R/DRD2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
三氧化鎢 99.8% metals basisAnti-phospho-IKK gamma (Ser376)/FITC 熒光素標(biāo)記化核因子κB激酶gamma抑制劑抗體IgG雞血管緊張素II受體1抗體(ANGⅡR1-Ab)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氟化鋁 99.9% metals basisAnti-phospho-IKK alpha (Tyr463) /FITC 熒光素標(biāo)記化核因子κB激酶alpha抑制劑抗體IgG雞載脂蛋白C1(ApoC1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氟鋁銨 98%Anti-phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) /FITC 熒光素標(biāo)記化核因子κB激酶alpha抑制劑抗體IgG雞肺癌標(biāo)志物DR-70(DR-70TM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
乙鈷,四水 99.9% metals basisAnti-Phospho-IKK alpha/IKK beta (Ser180/Ser181) /FITC 熒光素標(biāo)記化核因子κB激酶alpha/beta抑制劑抗體IgG雞黑素瘤缺乏因子2(AIM2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
硫鈷,七水 AR,99.5%Anti-Phospho-IKK alpha/beta (Ser176/Ser180) /FITC 熒光素標(biāo)記化核因子κB激酶alpha/beta抑制劑抗體IgG雞腦素受體(CNR1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
硫鈷,七水 99.99% metals basisAnti-phospho-IKK beta (Tyr466) /FITC 熒光素標(biāo)記化核因子κB激酶beta抑制劑抗體IgG雞酮脫氫酶酶(PDP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
堿式碳鎳 ARAnti-phospho-IKK beta (Tyr199) /FITC 熒光素標(biāo)記化核因子κB激酶beta抑制劑抗體IgG雞III型前膠原氨端原肽(PIIINP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鄰二酰亞 99%Anti-phospho-IKK beta (Tyr188) /FITC 熒光素標(biāo)記化核因子κB激酶beta抑制劑抗體IgG雞淀粉樣前體蛋白(APP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
1,3,5- CP,97%Anti-IL-4/FITC 熒光素標(biāo)記白介素4抗體IgG雞凝血酶原片段F1+2(F1+2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
1,2,4- 98%Anti-IL-4/FITC 熒光素標(biāo)記抗白介素4抗體(人)IgG雞載脂蛋白H(ApoH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氫氧化 電子級, 99.99% metals basis,鈉除外Anti-IL-4R/FITC 熒光素標(biāo)記白介素4受體抗體IgG雞C-Myc結(jié)合蛋白(MYCBP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氫氧化 電子級,99.999% metals basis,鈉除外Anti-IL-5/FITC 熒光素標(biāo)記白介素5抗體IgG雞神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4(NRG-4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氫氧化鈉 Ph. Eur., BP, NF, E524, 98-100.5%, pelletsAnti-IL-5R Alpha/CD125/FITC 熒光素標(biāo)記白介素-5受體α鏈抗體IgG雞血小板相關(guān)補體3(PAC3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
293FT細(xì)胞甘薯潛隱病Elisa試劑盒脂肪合成酶HDAC3/HD3 組蛋白去乙?;?抗體
反玉米素Elisa試劑盒絲聚蛋白/中間絲蛋白抗原HDAC2/HD2 組蛋白去乙?;?抗體
反式玉米素核苷Elisa試劑盒脂肪去飽和酶1HDAC12 組蛋白去乙?;?2抗體
磺轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒γ1氨丁偶聯(lián)血藍(lán)蛋白HDAC11 組蛋白去乙酰化酶11抗體
N-乙酰-β-D-氨葡萄糖苷酶Elisa試劑盒γ1氨丁偶聯(lián)牛血清白蛋白HDAC10 組蛋白去乙?;?0抗體
8-羥鳥嘌呤DNA糖苷酶Elisa試劑盒糖原合酶激酶-3 beta(多肽)HDAC1/HD1 組蛋白去乙?;?抗體
L-異天冬氨-轉(zhuǎn)移酶ⅠElisa試劑盒熒光素標(biāo)記慶大霉素HCV-NS4a 型肝炎病-NS4a抗體
核糖體蛋白Elisa試劑盒糖原合酶激酶-3α (多肽)HCV-NS3 型肝炎病-NS3抗體
錳超氧化物歧化酶Elisa試劑盒化糖原合酶激酶-3β (多肽)HCV-NS1 型肝炎病-NS1抗體