產(chǎn)品名稱:羊膜上皮細胞;HuAECs-11
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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HuAECs-11細胞
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T25
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FS-X3452
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公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無???白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
氮化鋁 N >32.5 % ,D97/5.0 μmAnti-IL-21R/FITC 熒光素標記白介素21受體抗體IgG雞胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
硫化銻 98%Anti-IL-22/ZCYTO18/FITC 熒光素標記白介素-22抗體IgG雞酪氨羥化酶(TH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氟化鋁 99%Anti-IL-22R/IL22RA1/FITC 熒光素標記白介素-22受體抗體IgG雞α-胞襯蛋白(SPTAN1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化鋁 99.998% metals basis ,塊狀A(yù)nti-IL-22BP/IL22RA2/FITC 熒光素標記白介素22受體結(jié)合蛋白抗體IgG雞葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
二化鋁 99%,粒徑15μmAnti-IL-23/FITC 熒光素標記白介素-23抗體IgG雞纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
碲化銻(III) 粉末,,99.96% metals basisAnti-IL-23R/FITC 熒光素標記抗白介素-23受體抗體IgG雞膽囊收縮素/腸促胰酶肽A受體(CCKAR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氟化鋇 99.9% metals basisAnti-IL-26/AK155/FITC 熒光素標記白介素26抗體IgG雞破骨激因子1 (OSF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氟化鋇 AR,99.0%Anti-IL-28A/IFNL2/FITC 熒光素標記白介素28A抗體IgG雞巨噬集落激因子(MCSF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氟化鋇 99.99% metals basis,10μmAnti-IL-28B/IL-28C/FITC 熒光素標記白介素28B抗體IgG雞胰島素樣蛋白3(INSL3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氟化鋇 99.999% metals basisAnti-IL-29/IFNL1/FITC 熒光素標記白介素29抗體IgG雞S100鈣結(jié)合蛋白A6(S100A6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化鉍 ARAnti-IL-31/FITC 熒光素標記白介素31抗體IgG雞膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化鉍 SPAnti-IL-31RA/CRL3/FITC 熒光素標記白介素31受體a抗體IgG雞前列腺素F受體(FP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化鉍 99.9%Anti-IL-32/NK4/FITC 熒光素標記白介素32抗體IgG雞反狀腺原氨(rT3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化鉍 99.99% metals basisAnti-IL-33/NFHEV/FITC 熒光素標記白介素33抗體IgG雞胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化鉍 99.999% metals basisAnti-IL-33/FITC 熒光素標記白介素33抗體IgG雞胃動蛋白1(GKN1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
HuAECs-11細胞DNA聚合酶δ1Elisa試劑盒血藍蛋白HBAB/AKR1C2 膽汁結(jié)合蛋白DDH2抗體
絲氨脫羧酶Elisa試劑盒Ki-67HBA1/Alpha globin/Hemoglobin 血紅蛋白α1抗體
果膠裂解酶Elisa試劑盒脂質(zhì)運載蛋白HB EGF/DTSF 肝素結(jié)合性表皮生長因子抗體
赤霉素20氧化酶Elisa試劑盒瘦素HAX1 造血干特異性相關(guān)結(jié)合蛋白1抗體
赤霉素2氧化酶Elisa試劑盒硝唑偶聯(lián)牛血清白蛋白HAVCR1/TIM1 腎損傷分子1抗體(型肝炎病受體1)
赤霉素3氧化酶Elisa試劑盒與血藍蛋白偶聯(lián)物HAUSP/USP7 皰疹病相關(guān)泛素特異性蛋白酶7抗體
赤霉素20氧化酶Elisa試劑盒重組髓鞘少樹突膠質(zhì)糖蛋白1-125HAUS4/C14orf94 14號染色體開放閱讀框94抗體
赤霉素2氧化酶Elisa試劑盒雙微體2癌因抗原HAS3 透明質(zhì)合成酶3抗體
赤霉素3氧化酶Elisa試劑盒硝唑偶聯(lián)雞卵白蛋白HAS1/Hyaluronan synthase 1 透明質(zhì)合成酶1抗體