產(chǎn)品名稱(chēng)：胃癌細(xì)胞；MKN-74
形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法：1：2傳代

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

金屬鏑 99.9% (REO)Anti-KLF9/FITC  熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體IgG雞酯酰肌特異性脂酶Cβ1(PLCβ1/PI-PLC)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氟化鏑 99.99% metals basisAnti-KLF13/RFLAT-1 /FITC  熒光素標(biāo)記腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子13抗體IgG雞周期素依賴(lài)性激酶1(CDK1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

溴化鏑(III) 無(wú)水, 粉末, 99.99% metals basisAnti-KLK1/FITC  熒光素標(biāo)記激肽釋放酶1抗體IgG雞載脂蛋白C4(ApoC4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

化鏑(III) 無(wú)水, 鱗片, 99.99% metals basisAnti-KLK3/FITC  熒光素標(biāo)記激肽釋放酶3/舒血管素3抗體IgG雞卵泡抑素(FST)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

硫鏑(III),八水 99.9%Anti-KLK4/FITC  熒光素標(biāo)記激肽釋放酶4抗體IgG雞促狀腺素(TSH)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

硫鏑(III) 99.99% metals basisAnti-KLK7/FITC  熒光素標(biāo)記激肽釋放酶7抗體IgG雞白抗原A(HLA-A)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化鉺 99.99%Anti-KLK9/FITC  熒光素標(biāo)記激肽釋放酶9抗體IgG雞EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體(EJ/GlyRS)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

氧化鉺 99.9% metals basisAnti-KLK10/FITC  熒光素標(biāo)記激肽釋放酶10抗體IgG雞肝配蛋白A受體10 (EPHA10)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氟化鉺 99.99% metals basisAnti-KLK14/FITC  熒光素標(biāo)記激肽釋放酶14抗體IgG雞蛋白激酶C-δ1(PKCδ1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

金屬鉺 99.9% metals basis,粉末,50目Anti-KLRF1/NKp80/FITC  熒光素標(biāo)記性受體NK-p80抗體IgG雞ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1元4(ADAMTS4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氟化鉺 99.9% metals basisAnti-K-ras/FITC  熒光素標(biāo)記原癌因K-ras抗體IgG雞早期生長(zhǎng)應(yīng)答蛋白3(EGR3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

化鉺(III),六水 99.5% metals basisAnti-KT3 tag/FITC  熒光素標(biāo)記KT3 tag標(biāo)簽抗體IgG雞乙酰膽堿酯酶關(guān)聯(lián)蛋白(ACHAP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

化鉺(III) 六水合物  99.995% metals basisAnti-KT3 tag/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記KT3 tag標(biāo)簽抗體IgG雞乙酰膽堿酯酶(AChE)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

溴化鉺(III)  超干, 99.99% REOAnti-KCNA5/FITC  熒光素標(biāo)記通道混合相關(guān)蛋白亞型5抗體IgG雞信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子1(STAT1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

化鉺(III) 無(wú)水, 粉末, 99.99%Anti-Ku-70/FITC  熒光素標(biāo)記DNA修復(fù)酶Ku70抗體IgG雞Apelin蛋白(APLN)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
MKN-74細(xì)胞β-半甘露聚糖酶Elisa試劑盒促狀腺素釋放GTPBP10/Claudin12  緊密連接蛋白12抗體

β-半糖甘露聚糖Elisa試劑盒胸腺五肽GTP cyclohydrolase 1/GTP-CH-1  三鳥(niǎo)苷環(huán)水解酶抗體

NAD激酶Elisa試劑盒狀腺素T4偶聯(lián)牛血清白蛋白GTF2H1  通用轉(zhuǎn)錄因子2H肽1抗體

NAD激酶Elisa試劑盒重組人腫瘤壞死因子GTF2B  通用轉(zhuǎn)錄因子GTF2B抗體

末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶GTDC1  糖轉(zhuǎn)移酶樣1抗體

甘薯病2Elisa試劑盒抗肽GstP1/GST class-pi  谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi因抗體

甘薯病CElisa試劑盒拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗原GSTO1  谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶ω1抗體

D-果糖Elisa試劑盒轉(zhuǎn)鐵蛋白GSTCD  谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶C段結(jié)構(gòu)域抗體

抗肽Elisa試劑盒色氨羥化酶(多肽)GSTA3  谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶A3抗體

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