實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

產(chǎn)品名稱：主動脈平滑肌細胞；HASMC
培養(yǎng)條件：平滑肌細胞培養(yǎng)基，scienCA-ll，貨號：1101

公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
氣相納米二氧化硅 99.8%,比表面積（BET）：170m2/g；粒徑：7-40nAnti-MCP-3/CCL7/FITC  熒光素標(biāo)記單核趨化蛋白3抗體(大、小鼠)IgG雞蛋白酪氨酶受體N(PTPRN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氣相納米二氧化硅 99.8%,比表面積（BET）：120m2/g；粒徑：7-40nAnti-MC-1R/FITC  熒光素標(biāo)記黑素皮質(zhì)素受體抗體IgG雞p53上調(diào)凋亡調(diào)節(jié)因子(PUMA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

疏水氣相納米二氧化硅 99.8%,比表面積(BET):230m2/g;;粒徑:7-40nAnti-M-CSF/FITC  熒光素標(biāo)記巨噬克隆激因子抗體IgG雞橋粒斑蛋白(DSP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氣相納米二氧化硅 99.8%,比表面積（BET）：100m2/g；粒徑：7-40nAnti-M-CSF Receptor/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠巨噬集落激因子受體抗體IgG雞功能相關(guān)抗原1(LFA-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

二氧化硅 99.5%,30±5nmAnti-Mcpt7/Tryptase Beta1/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠肥大蛋白酶7抗體IgG雞轉(zhuǎn)化生長因子β激蛋白22(TSC22)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

二氧化硅 99.5%,15±5nmAnti-TPSB2/Tryptase Beta2/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠肥大類胰蛋白酶β2IgG雞內(nèi)皮脂肪酶(EL/LIPG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氣相納米二氧化硅 99.8%,比表面積（BET）：380m2/g;粒徑：7-40nmAnti-MCT1/FITC  熒光素標(biāo)記單羧轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體IgG雞α2抗纖溶酶(α2-AP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

疏水性氣相納米二氧化硅 99.8%,比表面積（BET）：115m2/g；粒徑Anti-MDM2/FITC  熒光素標(biāo)記雙微體2癌因抗體IgG雞雙糖鏈蛋白聚糖(BGN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氣相納米二氧化硅 99.8%,比表面積（BET）：150m2/g；粒徑：7-40nAnti-Phospho-MDM2 (Ser166) /FITC  熒光素標(biāo)記化雙微體2癌因抗體IgG雞信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子6(STAT56)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

二氧化硅 99.9% metals basisAnti-Mdr-1/FITC  熒光素標(biāo)記多藥耐藥蛋白抗體IgG雞促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

碳化硅 99.9% metals basisAnti-Measles virus of fusion protein/FITC  熒光素標(biāo)記抗麻疹病抗體IgG雞T受體(TCR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

碳化硅 99%,0.5～0.7umAnti-MEF2A/FITC  熒光素標(biāo)記肌增強因子2抗體IgG雞游離狀腺原氨(fT3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

碳化硅 ≥99.00Anti-Phospho-MEF2A (Thr312) /FITC  熒光素標(biāo)記化肌增強因子2抗體IgG雞質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

納米碳化硅 99.9% metals basis,40nmAnti-Phospho-MEF2A (Ser408) /FITC  熒光素標(biāo)記化肌增強因子2抗體IgG雞降鈣素原(PCT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

二氧化錫 AR,99.5%Anti-Megsin/SER—PINB7 /FITC  熒光素標(biāo)記絲氨(或半胱氨)蛋白酶抑制劑B7抗體IgG雞質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP-8)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
HASMC細胞異戊烯腺嘌呤核苷Elisa試劑盒(親和純化) 狗IgGGoat Anti-rat IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗大鼠IgG

異戊烯腺嘌呤7-糖苷Elisa試劑盒(親和純化) 狗IgMGoat Anti-rat IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的羊抗大鼠IgG

脫氫抗壞血;氧化型抗壞血Elisa試劑盒(親和純化) 羊IgMGoat Anti-rat IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的羊抗大鼠IgG

質(zhì)膜氫-ATP酶Elisa試劑盒(親和純化) 豚鼠IgGGoat Anti-rat IgG/PE  PE標(biāo)記的羊抗大鼠IgG

無機焦酶Elisa試劑盒(親和純化) 豚鼠IgMGoat Anti-rat IgG/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗大鼠IgG

多不飽和脂肪Elisa試劑盒(親和純化) 馬IgGGoat Anti-rat IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的羊抗大鼠IgG

異淀粉酶Elisa試劑盒(親和純化) 馬IgMGoat Anti-rat IgG/FITC  FITC標(biāo)記的羊抗大鼠IgG

ADP酶Elisa試劑盒(親和純化) 猴IgGGoat Anti-rat IgG/Cy7  Cy7標(biāo)記的羊抗大鼠IgG

葉綠素b還原酶Elisa試劑盒(親和純化) 豬IgGGoat Anti-rat IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的羊抗大鼠IgG
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。