產品名稱:臍靜脈血管內皮細胞;HUVEC
生長特性:貼壁生長
培養(yǎng)條件:ECM專用培養(yǎng)基
傳代方法:1:2傳代
產品名稱
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規(guī)格
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貨號
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HUVEC細胞
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T25
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FS-X3470
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公司細胞現(xiàn)貨供應,質量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu),可改善細胞活力以及???凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
硝釤(III) 六水合物 99.9% metals basisAnti-MEK6/FITC 熒光素標記絲裂原活化蛋白激酶MKK6抗體IgG雞血管內皮生長因子165 (VEGF165)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
硝釤 99.999% metals basisAnti-MKK3/FITC 熒光素標記抗絲裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗體IgG雞c-fos 酶聯(lián)吸附測定試劑盒
化銀 99%Anti-Phospho-MKK3 (Ser189)/MKK6 (Ser207) /FITC 熒光素標記化絲裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗體IgG雞甘露聚糖結合凝集素相關絲氨蛋白酶2(MASP2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化鈧(Ⅲ) 99.99% (REO) Anti-Phospho-MEK6 (Ser207)/FITC 熒光素標記化絲裂原活化蛋白激酶MKK6抗體IgG雞凝血因子Ⅱ(F2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化鈧(Ⅲ) 99.999% (REO)Anti-Phospho-MEK6 (Ser202)/FITC 熒光素標記化絲裂原活化蛋白激酶MKK6抗體IgG雞半胱天冬酶3(CASP3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
溴化銀 99.9%Anti-Phospho-MKK7 (Ser271/Thr275) /FITC 熒光素標記化絲裂原活化蛋白激酶MKK7抗體IgG雞胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
溴化銀 98%Anti-MKP-1/DUSP1/FITC 熒光素標記絲裂原活化蛋白激酶酶-1抗體IgG雞白調節(jié)素(LR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
草鍶 5N,99.999%Anti-Phospho-MKP1 (Ser359)/FITC 熒光素標記化絲裂原活化蛋白激酶酶-1抗體IgG雞抗鈣調素特異抗體(CAM-Ab)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
化鏑(III) 99.9%,無水級,充氬封裝Anti-Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318)/FITC 熒光素標記化絲裂原活化蛋白激酶酶-1抗體IgG雞睪酮受體(TR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
二氧化硅 ARAnti-MKP-2/DUSP4/FITC 熒光素標記絲裂原活化蛋白激酶酶-2抗體IgG雞前動力蛋白受體1(PKR1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化銀 99.99% metals basisAnti-MLK3 /FITC 熒光素標記絲氨/蘇氨蛋白激酶MLK3抗體IgG雞脂氧素A4(LXA4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
二氧化硅 99.99%,1-3mmAnti-Phospho-MLK3 (Thr277/Ser281)/FITC 熒光素標記化絲氨/蘇氨蛋白激酶MLK3抗體IgG雞脂肪分化相關蛋白(ADRP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
化銀 99.99%Anti-MLCK/FITC 熒光素標記肌球蛋白輕鏈激酶抗體IgG雞谷氨脫羧酶1(GAD1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鈦鍶 99.5% trace metals basis,納米, <100 nmAnti-Myosin Phosphatase/FITC 熒光素標記肌球蛋白酶抗體IgG雞前白蛋白(PA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鈦鍶 99.5% metals basis,粉末, 5 μmAnti-Phospho-MYPT1 (Ser507)/FITC 熒光素標記化肌球蛋白酶抗體IgG雞真核翻譯起始因子3a(eIF3a)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
HUVEC細胞脈斑駁病Elisa試劑盒兔抗人Kappa鏈抗血清(k-鏈抗血清)Goat anti-rat IgG whole serum 羊抗大鼠IgG抗血清
褪綠病Elisa試劑盒兔抗人IgG(γ-鏈)恒定區(qū)抗血清Goat Anti-rat IgG 羊抗大鼠IgG
輕斑駁病Elisa試劑盒牛血清白蛋白抗血清Goat Anti-rabbit IgG/RBITC 羅丹明標記的羊抗兔IgG
葉脈斑駁病Elisa試劑盒熒光素Cy7標記兔IgG(流式同型對照)Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的羊抗兔IgG
酪蛋白激酶Elisa試劑盒熒光素Cy7標記小鼠IgG(流式同型對照)Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的羊抗兔IgG
羥賴氨吡啶啉Elisa試劑盒熒光素Cy7標記羊IgG(流式同型對照)Goat Anti-rabbit IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的羊抗兔IgG
賴氨吡啶啉Elisa試劑盒熒光素Cy7標記大鼠IgG(流式同型對照)Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的羊抗兔IgG
玉米黃質Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標記兔IgG(流式同型對照)Goat Anti-rabbit IgG/PE PE標記的羊抗兔IgG
β-隱黃質Elisa試劑盒熒光素PE標記兔抗FITCGoat Anti-rabbit IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的羊抗兔IgG
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