公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱：血管內(nèi)皮細(xì)胞；ECV304
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

特征特性：原以為該細(xì)胞是人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，但后來發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞被人膀胱癌細(xì)胞污染。

培養(yǎng)條件：DMEM(高糖）+10%FBS

傳代方法：1：2傳代
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無??玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

氧化鋱 99.9% metals basisAnti-MMP-9/FITC  熒光素標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白酶-9抗體IgG雞肌腱蛋白R(shí)(TNR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化鋱 99.99% metals basisAnti-MMP-10/FITC  熒光素標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白酶-10抗體IgG雞原鈣黏素β2(PCDHβ2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化鋱 99.999% metals basisAnti-MMP-11/FITC  熒光素標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白酶-11抗體IgG雞角蛋白20(CK20/KRT20)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氧化銩 99.99% metals basisAnti-MMP-12/FITC  熒光素標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白酶-12/巨噬金屬?gòu)椓Φ鞍酌缚贵wIgG雞叉頭框蛋白P1(FOXP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

三氧化二鈦 200 mesh, 99.9%Anti-MMP-13 /FITC  熒光素標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白酶13抗體IgG雞抗氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

二硫化鎢  99.9%Anti-MMP-14/FITC  熒光素標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白酶-14抗體IgG雞白介素24 (IL-24)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

二硫化鎢  99.99%，6μmAnti-MMP-15/FITC  熒光素標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白酶-15抗體IgG雞谷氨脫羧酶樣蛋白1(GADL1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

錫 AR,99.5%Anti-MMP-16/FITC  熒光素標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白酶-16抗體IgG雞蛋白激酶C(PKC)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

錫 AR,100目Anti-MMP-17/FITC  熒光素標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白酶-17抗體IgG雞纖維蛋白肽A(FPA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

錫 SPAnti-MMP-20/FITC  熒光素標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白酶20抗體IgG雞粘蛋白20(MUC20)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

錫 99.99% metals basisAnti-MMP-26/FITC  熒光素標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白酶-26抗體IgG雞胰島素樣生長(zhǎng)因子不穩(wěn)定亞(IGFALS)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

高純錫 99.999% metals basis，1-6mm，顆粒Anti-Moesin/FITC  熒光素標(biāo)記膜突蛋白抗體IgG雞防御素α5(DEFα5)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

錫 99.9999%Anti-MOG /FITC  熒光素標(biāo)記髓鞘少樹突膠質(zhì)糖蛋白抗體IgG雞ras同源物因家族成員b(RHOB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

錫 99.99999%Anti-HSA/FITC  熒光素標(biāo)記鼠抗人血清白蛋白抗體IgG雞胰腺再生蛋白1β(REG1β)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鈦粉 99.99% metals basis,300目Anti-HAS/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人血清白蛋白抗體IgG雞染色盒同源物3(CBX3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
ECV304細(xì)胞ATP酶Elisa試劑盒熒光素PE標(biāo)記雞IgMGoat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗兔IgG

玉米黃質(zhì)環(huán)氧化酶Elisa試劑盒熒光素PE標(biāo)記狗IgMGoat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗兔IgG

脫落氧化酶Elisa試劑盒熒光素PE標(biāo)記羊IgMGoat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗兔IgG

吲哚酮Elisa試劑盒熒光素PE標(biāo)記豚鼠IgGGoat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗兔IgG

β-1,3葡聚糖合成酶Elisa試劑盒熒光素PE標(biāo)記豚鼠IgMGoat anti-Rabbit IgG whole serum  羊抗兔IgG抗血清

脂肪酰輔酶A還原酶Elisa試劑盒熒光素PE標(biāo)記馬IgGGoat Anti-rabbit IgG  羊抗兔IgG

阿魏酰轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒熒光素PE標(biāo)記馬IgMGoat Anti-Mouse IgM/RBITC  羅丹明標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

DNA化轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒熒光素PE標(biāo)記人IgGGoat Anti-Mouse IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

花葉病Elisa試劑盒熒光素PE標(biāo)記人IgMGoat Anti-Mouse IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM