產(chǎn)品名稱：胰腺癌細(xì)胞；Panc03.27
形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法：1：2傳代

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99%Anti-Notch1/MOTC /FITC  熒光素標(biāo)記跨膜受體蛋白Notch-1抗體IgG雞抗神經(jīng)節(jié)苷脂M1抗體(Anti-GM1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-Notch3/FITC   熒光素標(biāo)記跨膜受體蛋白Notch-3抗體IgG雞金屬硫蛋白1M (MT1M)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

溴 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-Nox-4/NADH /FITC  熒光素標(biāo)記NADPH氧化酶4抗體IgG雞內(nèi)皮抑制素(ES)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

溴Anti-NPPC/FITC  熒光素標(biāo)記促尿鈉排泄肽前體C抗體IgG雞纖溶抑制因子(TAFI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

霜霉威 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99%Anti-NP/FITC  熒光素標(biāo)記任酚抗體IgG雞破骨分化因子(ODF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

霜霉威Anti-NPM/FITC  熒光素標(biāo)記核仁蛋白抗體IgG雞血紅素氧化酶1(HO1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

蟲酰肼 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99%Anti-Phospho-NPM (Ser4)/FITC  熒光素標(biāo)記化核仁蛋白抗體IgG雞脫氫酶B(LDHB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

蟲酰肼Anti-Phospho-NPM (Thr95)/FITC  熒光素標(biāo)記化核仁蛋白抗體IgG雞血幼素(HJV/HFE2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

六溴 99%Anti-Phospho-NPM (Thr199) /FITC  熒光素標(biāo)記化核仁蛋白抗體IgG雞胰島素樣生長因子1受體(IGF1R)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

恩諾沙星 98%Anti-NPY /FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)肽 Y抗體IgG雞微粒體谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶1(MGST1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

防護(hù)服 M碼Anti-NPY2R/FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)肽Y受體2抗體IgG雞內(nèi)腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

碳乙烯酯 98.0%Anti-NPY1R/FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)肽Y1受體抗體IgG雞回腸脂肪結(jié)合蛋白6(FABP6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

4,4'-二聯(lián)  >98%（GC）Anti-NQO1/FITC  熒光素標(biāo)記醌氧化還原酶抗體IgG雞復(fù)制蛋白A(RPA-70)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氣泡墊,用于玻璃瓶貼身保護(hù)Anti-NR1/NMDAR1/FITC  熒光素標(biāo)記谷氨受體1抗體IgG雞促狀腺素釋放(TRH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鹽  電子級,37%Anti-NR1/NMDAR1/GLUR1/FITC  熒光素標(biāo)記谷氨受體1抗體IgG雞心肌營養(yǎng)素合成酶/心脂合酶(CLS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Panc03.27細(xì)胞α-白蛋白Elisa試劑盒辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗人IgAGoat Anti-human IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgG

ACC合成酶Elisa試劑盒熒光素APC標(biāo)記羊IgG(流式同型對照)Goat Anti-human IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗人IgG

吲哚乙氧化酶Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記人血白蛋白Goat anti-human IgG whole serum  羊抗人IgG抗血清

麥芽糖Elisa試劑盒(親和純化)人IgMGoat Anti-human IgG  羊抗人IgG

糖異構(gòu)酶Elisa試劑盒兔抗HRPGoat Anti-Guinea pig IgG/RBITC  羅丹明標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG

果糖-1,6-二縮酶Elisa試劑盒(親和純化) 人IgGGoat Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG

果糖-6--1-轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒(親和純化) 人型IgAGoat Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG

結(jié)合態(tài)吲哚乙Elisa試劑盒生物素化人IgGGoat Anti-Guinea pig IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG

β甘露聚糖酶Elisa試劑盒熒光素Cy3標(biāo)記豬胰島素蛋白Goat Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG

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