公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱：視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤；Y79
形態(tài)特性：圓形，成簇生長

生長特性：懸浮生長

特征特性：1971年1月，該細(xì)胞由ReidTW及其同事從病人右眼切除的腫瘤進(jìn)行原代培養(yǎng)建立而成，此病人有很強(qiáng)的視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的母系家族遺傳性。該細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，如核膜內(nèi)折、三層膜結(jié)構(gòu)、大的被膜小泡、環(huán)孔板、微管、中心粒、基粒等都與原始腫瘤相似。

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法：1：2傳代
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

2-溴乙烯 97%,含0.1%對叔丁鄰二酚(TBC)穩(wěn)定劑Anti-p70 S6 Kinase Beta2/P70 Beta2/FITC  熒光素標(biāo)記核糖體S6蛋白激酶β2抗體IgG綿羊抗生長抗體(GHAb)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

5-氨乙酰鹽鹽 99%Anti-Phospho-p63 (Ser455)/FITC  熒光素標(biāo)記化P63腫瘤抑制因抗體IgG綿羊阻抑素(PHB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

土木香內(nèi)酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥97%(HPLC)Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) /FITC  熒光素標(biāo)記化P63腫瘤抑制因抗體IgG綿羊半凝集素7(GAL7)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

4-溴丁 98%Anti-P311 protein/FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)再生相關(guān)蛋白抗體IgG綿羊凝血因子XIII A1多肽(F13A1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

1-Boc-單哌 98%Anti-VIP receptor II/FITC  熒光素標(biāo)記腺苷環(huán)化酶激活肽受體-II/血管活性腸肽受體-II抗體IgG綿羊載脂蛋白E(ApoE)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

5-氧化吲哚 98%Anti-PACAP/VIP receptor-I /FITC  熒光素標(biāo)記腺苷環(huán)化酶激活肽受體-I/血管活性腸肽-I抗體IgG綿羊黏著斑激酶(FAK)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

7-吲哚 98%Anti-PACAP-27/38 /FITC  熒光素標(biāo)記腺苷環(huán)化酶激活肽-27/38抗體IgG綿羊血管緊張肽酶A(ATA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

DL-肉堿鹽鹽 98%Anti-PACAP-38 /FITC  熒光素標(biāo)記腺苷環(huán)化酶激活肽-38抗體IgG綿羊角蛋白19(CK-19/KRT19)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

暈 97%Anti-PADI4/PAD4 /FITC  熒光素標(biāo)記關(guān)節(jié)炎相關(guān)因抗體IgG綿羊血管緊張素II受體2(ANGⅡR2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2,6-二-O--β-環(huán)糊精 98%Anti-PAF/FITC  熒光素標(biāo)記血小板活化因子抗體IgG綿羊白介素23(IL-23)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2，4-二巰嘧啶 98%Anti-PAFR/FITC  熒光素標(biāo)記抗血小板活化因子受體抗體IgG綿羊多聚ADP核糖聚合酶4(PARP4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

N-十二烷-2-吡咯烷酮 99%Anti-PAI-1/FITC  熒光素標(biāo)記纖溶酶原激活物抑制因子抗體IgG綿羊甘油變位酶2(PGAM2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鹽多巴 98%Anti-PAI-2/FITC  熒光素標(biāo)記纖溶酶原激活物抑制因子2抗體體IgG綿羊多配體聚糖1(SDC1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2,2'-二羥聯(lián) 99%Anti-PALB2/FITC  熒光素標(biāo)記癌易感因相關(guān)蛋白2IgG綿羊白介素27(IL-27)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

L-(-)-二(對酰) 97%Anti-Pan-ras/FITC  熒光素標(biāo)記抗Pan ras抗體IgG綿羊性結(jié)合球蛋白(SHBG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Y79細(xì)胞硫代葡萄糖苷Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記人IgAGNPAT  二羥酮酰轉(zhuǎn)移酶抗體

線粒體膜H+-ATPaseElisa試劑盒羅丹明標(biāo)記猴IgGGNMT  甘氨-N-轉(zhuǎn)移酶

單脫氫抗壞血還原酶Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記猴IgMGNLY/NKG5  顆粒溶素抗體

脯氨脫氫酶Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記小鼠IgMGNLY/NKG5  顆粒溶素抗體

△1-吡咯啉-5-羧合成酶Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記豬IgGGNL1  鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白1抗體

鳥氨轉(zhuǎn)氨酶Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記水貂IgGGNG2  G蛋白γ2抗體/鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白γ2抗體

氨合成酶Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記兔IgMGNAT3  G蛋白轉(zhuǎn)錄因子α3抗體

13-賴氨酰氧化酶Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記大鼠IgMGNAQ/Gα q  G蛋白α亞單位蛋白Q抗體

9-賴氨酰氧化酶Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記重組人白介素-1受體拮抗劑GNAO1/G0 Protein alpha   G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白O亞A2抗體

產(chǎn)品留言

標(biāo)題

聯(lián)系人

聯(lián)系電話

內(nèi)容

驗(yàn)證碼

點(diǎn)擊換一張

注：1.可以使用快捷鍵Alt+S或Ctrl+Enter發(fā)送信息!
2.如有必要,請您留下您的詳細(xì)聯(lián)系方式!