公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：該細(xì)胞源自64歲內(nèi)膜癌女性患者

培養(yǎng)條件：DMEM(高糖）+10%FBS

傳代方法：1:3傳代，CQ-4天換液一次
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

Anti-phospho C-Myc(pThr58/pSer62)/FITC  熒光素標(biāo)記抗化致癌因C-Myc抗體IgG綿羊Smad同源物1 (Smad1/MADH1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-phospho C-Met/pHGFR(pTyr1365)/FITC  熒光素標(biāo)記抗化原癌因c-Met抗體IgG綿羊胞漿蛋白1(STMN1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-phospho-c-Jun/AP-1(pThr91/pThr93)/FITC  熒光素標(biāo)記抗化原癌因c-Jun抗體IgG綿羊表面膜球蛋白D(mIgD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-phospho-c-Jun (Ser243) /FITC  熒光素標(biāo)記化原癌因c-Jun抗體IgG綿羊胸腺依賴性抗原(TD-Ag)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-phospho-c-Jun (Thr93) /FITC   熒光素標(biāo)記化原癌因c-Jun抗體IgG綿羊白介素8(IL-8)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-phospho-c-Jun (Ser63) /FITC   熒光素標(biāo)記化原癌因c-Jun抗體IgG綿羊白分化抗原CD40配體(CD40L/TNFSF5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-phospho-MEK1/MAPKK1(pSer298)/FITC  熒光素標(biāo)記抗化絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體IgG綿羊嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員1(EAR1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-phospho Histone H1,4(pSer27)/FITC  熒光素標(biāo)記抗化組蛋白H1,4樣蛋白抗體IgG綿羊血管緊張素II (ANG II)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-phospho c-kit/SCFR/CD117(pTyr936)FITC  熒光素標(biāo)記抗化原癌因c-kit抗體IgG綿羊去唾液糖蛋白受體2(ASGR2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-Phospho-c-Kit (Tyr703) /FITC  熒光素標(biāo)記化原癌因c-kit抗體IgG綿羊粘蛋白21(MUC21)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-Phospho-c-Kit (Tyr719) /FITC  熒光素標(biāo)記化原癌因c-kit抗體IgG綿羊成纖維生長因子受體4(FGFR4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-Phospho-FAK (Tyr397) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化粘著斑激酶抗體IgG綿羊肌球蛋白重鏈10(MYH10)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-P-HP1/FITC  熒光素標(biāo)記抗異染色質(zhì)蛋白1化抗體（果蠅）IgG綿羊球蛋白A Fc段受體(FcαR/CD89)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-P-HP1/FITC  熒光素標(biāo)記抗異染色質(zhì)蛋白1化抗體（果蠅）IgG綿羊粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-Phospho-HP1 gamma (Ser83) /FITC  熒光素標(biāo)記化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體IgG綿羊谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶θ2(GSTθ2/GSTt2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
KLE細(xì)胞CD68分子Elisa試劑盒小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體GLT8D2  糖轉(zhuǎn)移酶GLT8D2抗體

CD8分子Elisa試劑盒人胸腎表達(dá)趨化因子GLT8D1  糖轉(zhuǎn)移酶8結(jié)構(gòu)域1抗體

脂肪因子Elisa試劑盒人B-趨化因子GLT8D1  糖轉(zhuǎn)移酶8結(jié)構(gòu)域1抗體

c-Jun氨末端激酶Elisa試劑盒小鼠脂酰絲氨GLP2R  胰高血糖素樣肽2受體抗體

CX3C趨化因子;fractalkineElisa試劑盒兔子轉(zhuǎn)化生長因子βGLP-2  胰高血糖素樣肽-2抗體

CX3C趨化因子受體1Elisa試劑盒魚促腎上腺皮質(zhì)GLP-2  胰高血糖素樣肽-2抗體

CXC趨化因子配體1Elisa試劑盒大鼠可溶性凋亡相關(guān)因子GLP-1R  胰高血糖素樣肽-1受體抗體

CXC趨化因子受體4Elisa試劑盒人膜粘連蛋白 Ⅱ ELISA 試劑盒GLP-1(1G9)  GLP-1單克隆抗體

C-反應(yīng)蛋白Elisa試劑盒小鼠膽堿甘油酯GLP-1 (7-36)  胰高血糖素樣肽-1抗體