形態(tài)特性：上皮細胞樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：這個細胞株源自高度分化的鱗癌。

培養(yǎng)條件：RPMI-1640(GIBCO,添加NaHCO31.5g/L,glucose2.5g/L,SodiumPyruvate0.11g/L)，90%；胎牛血清，10%。氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

傳代方法：1:2傳代

公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Anti-PLAU/uPA/FITC  熒光素標(biāo)記尿激酶型纖溶酶原激活因子抗體IgG綿羊成纖維生長因子7(FGF7/KGF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-Plectin/FITC  熒光素標(biāo)記網(wǎng)蛋白抗體IgG綿羊趨化因子C-C-元配體14(CCL14)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-PLAUR/uPAR/FITC  熒光素標(biāo)記尿激酶型纖溶酶原激活因子受體抗體IgG綿羊碳酐酶III(CA3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-Plexin A1/Plexin 1/FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)叢蛋白A1抗體IgG綿羊羧肽酶E(CPE)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-Plexin A2/FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)叢蛋白A2抗體IgG綿羊核因子-κB亞p65(NF-κB p65)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-Plexin B1/Semaphorin receptor/FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)叢蛋白B1抗體IgG綿羊核轉(zhuǎn)錄因子Y亞γ(NFYC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-PLASTIN3/T Plastin/FITC  熒光素標(biāo)記絲束蛋白T Plastin抗體IgG綿羊維受體α(RARα)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-PLG/FITC  熒光素標(biāo)記纖維蛋白溶酶原抗體IgG綿羊補體組分1Q受體1(C1qR1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-PLGF/FITC  熒光素標(biāo)記胎盤生長因子抗體IgG綿羊堿性成纖維生長因子(bFGF/FGF2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-PLGF /FITC  熒光素標(biāo)記人胎盤生長因子（抗體）IgG綿羊甘露糖受體(MR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-PLGF/FITC  熒光素標(biāo)記小鼠胎盤生長因子抗體IgG綿羊成纖維生長因子受體底物2(FRS2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-PMP2 /FITC  熒光素標(biāo)記周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗體IgG綿羊XC趨化因子受體1(XCR1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-PMP-22/FITC  熒光素標(biāo)記外周髓鞘蛋白-22IgG綿羊III型膠原交聯(lián)羧端肽(CTX-III)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-PMSA/FOLH1/FITC  熒光素標(biāo)記前列腺特異膜抗原抗體IgG綿羊胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-PMS2/FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤錯配修復(fù)因PMS2抗體IgG綿羊嗜中性粒防御素α1(DEFα1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
HCC94細胞N-乙酰-β-D-氨葡萄糖苷酶Elisa試劑盒乙型肝炎表面抗體GilZ/TilZ  糖皮質(zhì)誘導(dǎo)亮氨拉鏈蛋白抗體

骨膜蛋白Elisa試劑盒乙型肝炎e抗原Gigaxonin  巨軸索蛋白GAN抗體

Phospho (637)-DRP1Elisa試劑盒乙型肝炎e抗體GIG8/ID2  DNA結(jié)合抑制因子2抗體

Pim-2原癌因Elisa試劑盒乙型肝炎核心抗體GIG22/DNAJC15  生長抑制蛋白22抗體（化控制J蛋白）

pro-MMP-9Elisa試劑盒乙型肝炎表面抗原GIDRP88  生長抑制和分化相關(guān)蛋白抗體

PTEN;MMAC1Elisa試劑盒乙型肝炎表面抗體Gibberellins  牛磺/β-氨乙磺抗體

P物質(zhì)Elisa試劑盒乙型肝炎e抗原Gibberellins  抗赤霉素抗體

P選擇素Elisa試劑盒乙型肝炎e抗體GHRF/GHRH  生長釋放抗體

Qa抗原2Elisa試劑盒乙型肝炎核心抗體Ghrelin/Obestatin  腦腸肽抗體