實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：CS-33A細(xì)胞株是N.Auersperg從宮頸癌切片中建立的一系列細(xì)胞株(參見ATCCCRL-1594和ATCCCRL-1595)中的一株。細(xì)胞一開始就表現(xiàn)出亞二倍體核型及上皮細(xì)胞形態(tài)。連續(xù)傳代可以觀察到核型不穩(wěn)定。存在成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤蛋白(pRB)，但大小不正常。P53表達(dá)上調(diào)，且有一個(gè)273位密碼子的點(diǎn)突變導(dǎo)致Arg->Cys的替換。人**瘤病毒DNA及RNA陰性。

培養(yǎng)條件：MEM培養(yǎng)基(GIBCO,添加NaHCO31.5g/L，SodiumPyruvate0.11g/L)，90%；胎牛血清，10%。氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

傳代方法：1:2傳代

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
Anti-PTPRJ/CD148/DEP1/FITC  熒光素標(biāo)記CD148抗體IgG綿羊原纖維蛋白2(FBN2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-CD150/SLAM/FITC  熒光素標(biāo)記CD150抗體IgG綿羊胞漿型脂酶A2(cPLA2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Rabbit Anti-human sIgA/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人型IgA抗體綿羊半糖6硫酯酶(Gal-6S)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

Anti-Rabbit Anti--mouse IgA/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗小鼠IgA抗體綿羊血管活性腸肽(VIP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-PTTG/FITC  熒光素標(biāo)記垂體腫瘤轉(zhuǎn)化因抗體IgG綿羊脂酶A2受體1(PLA2R1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-Raptor /FITC  熒光素標(biāo)記mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgG綿羊球蛋白G1(IgG1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-Rad17/FITC  熒光素標(biāo)記周期檢控Rad17蛋白抗體IgG綿羊色素P450家族成員1A2(CYP1A2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-Phospho-Rad17 (Ser645) /FITC  熒光素標(biāo)記化周期檢控Rad17蛋白抗體IgG綿羊載脂蛋白C1(ApoC1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-Rad51/FITC  熒光素標(biāo)記Rad51抗體IgG綿羊蛋白17(Sp17)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-Rad52/FITC  熒光素標(biāo)記Rad52抗體IgG綿羊γ谷氨酰半胱氨合成酶(γ-ECS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-RAD51C/FITC  熒光素標(biāo)記癌和卵巢癌易感因RAD51C抗體IgG綿羊生存素(Surv)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-RAM-11/FITC  熒光素標(biāo)記抗RAM-11抗體IgG綿羊NOD樣受體(NLR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-RAMP-1/FITC  熒光素標(biāo)記受體活性調(diào)制蛋白1抗體IgG綿羊唾液(SA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

anti-RAP1A/FITC  熒光素標(biāo)記抗Rap1抗體IgG綿羊蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M2(M-AChRM2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

Anti-RAR- Alpha /FITC  熒光素標(biāo)記維受體-α 抗體IgG綿羊神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
CS-33A細(xì)胞α黑色素Elisa試劑盒巨病 IgG(間接法二步法)GDNF Receptor alpha 2  膠質(zhì)系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α2抗體

α平滑肌肌動蛋白Elisa試劑盒巨病 IgM(間接法二步法)GDNF  膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體

α葡萄糖苷酶Elisa試劑盒巨病 IgM(捕獲法一步法)GDN/SERPINE2  膠質(zhì)源性連接蛋白抗體

α酮戊二脫氫酶Elisa試劑盒巨病 IgM(捕獲法二步法)GDIA2/ARHGDIB  腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因GDIA2抗體

α酮戊二脫氫酶復(fù)合體Elisa試劑盒風(fēng)疹胞病 IgG(間接法二步法)GDIA1  腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因GDIA1抗體

β1腎上腺素受體抗體Elisa試劑盒風(fēng)疹胞病 IgM(間接法二步法)GDF9  生長分化因子9抗體

β2腎上腺素受體抗體Elisa試劑盒風(fēng)疹病 IgM(捕獲法一步法)GDF9  生長分化因子9抗體

β2微球蛋白Elisa試劑盒人球蛋白G Fc段受體ⅠGDF8/MSTN  生長分化因子8抗體

β氨己糖苷酶Elisa試劑盒鮭魚補(bǔ)體蛋白3GDF8  生長分化因子8/肌肉抑制素抗體
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

???法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。