產(chǎn)品名稱:PtK1(NBL-3)袋鼠腎細(xì)胞
形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
生長特性:貼壁生長
1962年,K.H.Walen從表觀正常的有袋大鼠的腎建立了PtK1細(xì)胞株。過氧化物染色顯示角蛋白陽性。
培養(yǎng)條件:EMEM+10%FBS
傳代方法:1:2傳代
產(chǎn)品名稱
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PtK1(NBL-3)袋鼠腎細(xì)胞
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規(guī)格
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T25
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貨號
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FS-X3513
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細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況???包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器備。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.
公司優(yōu)勢:
1.具有多年的銷售經(jīng)驗的行業(yè)背景,我司秉承質(zhì)量優(yōu)先的理念,希望廣大科研工作者與我司達(dá)成長期的合作關(guān)系;
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冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
Anti-Smac/DIABLO/FITC 熒光素標(biāo)記線粒體促凋亡蛋白抗體IgG綿羊唾液淀粉酶α1(AMY1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Anti-phosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic/FITC 熒光素標(biāo)記化SMAD抗體IgG綿羊白介素13(IL-13)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Anti-Smad 1/FITC 熒光素標(biāo)記Smad 1抗體IgG綿羊核糖核酶III(RNASEN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Anti-Phospho-Smad1 (Ser206) /FITC 熒光素標(biāo)記化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體IgG綿羊血管緊張素II受體1抗體(ANGⅡR1-Ab)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Anti-Phospho-Smad1/5 (Ser463/465)/FITC 熒光素標(biāo)記化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1/5抗體IgG綿羊激肽原1(KNG1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Anti-Smad2/3 /FITC 熒光素標(biāo)記Smad 2/3抗體IgG綿羊死亡相關(guān)蛋白6(DAP6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Anti-phospho-Smad2(p-Ser465) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、牛,馬,犬,雞化Smad2抗體IgG綿羊心肌營養(yǎng)素1(CT-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Anti-Phospho-Smad2 (Ser465/467)/FITC 熒光素標(biāo)記化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體IgG綿羊腺苷三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G1(ABCG1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Anti-Phospho-Smad2 (Ser245/250/255)/FITC 熒光素標(biāo)記化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體IgG綿羊BCL2修飾因子(BMF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Anti-Phospho-Smad3 (Ser423/425) /FITC 熒光素標(biāo)記化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體IgG綿羊性神經(jīng)鞘脂酶(ASM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Anti-Smad4/FITC 熒光素標(biāo)記Smad4抗體IgG綿羊N端外顯肽(Ext-N)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Anti-Smad7/FITC 熒光素標(biāo)記Smad 7抗體IgG綿羊球蛋白E Fc段受體II(FcεR II)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Anti-SMC1/FITC 熒光素標(biāo)記染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體IgG綿羊髓系觸發(fā)受體-1(TREM-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Anti-Phospho-SMC1 (Ser360) /FITC 熒光素標(biāo)記化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體IgG綿羊孕烷受體(PXR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
Anti-Phospho-SMC1 (Ser957)/FITC 熒光素標(biāo)記化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體IgG綿羊膽固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(SREBP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
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氨Elisa試劑盒抗-HAV IgM(夾心法 一步法) GABPB2 核呼吸因子2抗體
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