公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。
產(chǎn)品名稱
|
規(guī)格
|
貨號(hào)
|
CT-26細(xì)胞
|
T25
|
FS-X3515
|
產(chǎn)品名稱:小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞;CT-26
形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
特征特性:CT26是以N-nitroso-N-methylurethane-(NNMU)誘導(dǎo)形成的未分化結(jié)腸癌細(xì)胞株。它克隆形成的細(xì)胞株命名為CT26.WT(ATCCCRL-2638)。用包含編碼典型腫瘤相關(guān)抗原(TAA)beta-半乳糖苷酶(beta-gal)的lacZ基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CT26.WT,得到致死的亞克隆CT26.CL25(ATCCCRL-2639)。即使CT26.CL25表達(dá)了典型的TAAbeta-半乳糖苷酶,在正常小鼠中CT26.CL25和CT26.WT的生長(zhǎng)率與致死率也保持基本一致。與CT26.CL25(ATCCCRL-2639)一起可用作測(cè)試程序的模型,并用于研究宿主反應(yīng)。2001年七月提交到ATCC的培養(yǎng)物污染了支原體。其后代通過(guò)BM細(xì)胞周期蛋白處理21天消除支原體。處理后六周,用Hoechst染色、PCR和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)測(cè)試進(jìn)行支原體檢測(cè)。結(jié)果都呈陰性。
培養(yǎng)條件:RPMI1640+10%FBS
傳代方法:1:2傳代
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
Anti-SP-A/FITC 熒光素標(biāo)記肺表面活性蛋白A抗體IgG綿羊雌誘導(dǎo)蛋白PS2 (EIPS2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
anti-SPA-1/SIPA-1 熒光素標(biāo)記抗信號(hào)感應(yīng)增殖相關(guān)蛋白 1抗體IgG綿羊球蛋白G Fc片段(Fcγ)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
Anti-SPAG5/map126 /FITC 熒光素標(biāo)記抗相關(guān)抗原5抗體IgG綿羊嗜粒趨化因子受體(ECFR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
Anti-SPARC/FITC 熒光素標(biāo)記富含半胱氨的性蛋白抗體IgG綿羊腦素受體(CNR1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
Anti-SP-B/FITC 熒光素標(biāo)記肺表面活性蛋白B抗體IgG綿羊血管**素樣蛋白6(ANGPTL6)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
Anti-SP-D/FITC 熒光素標(biāo)記肺表面活性蛋白D抗體IgG綿羊氧化低密度脂蛋白(OxLDL)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
Anti-Spectrin- Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記血影蛋白/收縮蛋白抗體IgG綿羊BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
Anti-SPHK1/FITC 熒光素標(biāo)記鞘氨激酶1抗體IgG綿羊骨鈣素(OC/BGP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
Anti-SPHK2/FITC 熒光素標(biāo)記鞘氨激酶2抗體IgG綿羊中間α球蛋白抑制因子H4(ITIH4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
Anti-Spindlin 1/SPIN-2/FITC 熒光素標(biāo)記Spindlin 1/SPIN-2 腫瘤形成相關(guān)因抗體IgG綿羊金屬硫蛋白1M (MT1M)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
Anti-SPY /FITC 熒光素標(biāo)記抗spindly抗體IgG綿羊成纖維生長(zhǎng)因子21(FGF21)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
Anti-SRC /FITC 熒光素標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體IgG綿羊心肌營(yíng)養(yǎng)素合成酶/心脂合酶(CLS)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
Anti-phospho-Src (Tyr418)/FITC 熒光素標(biāo)記化Src原癌因抗體IgG綿羊HtrA絲氨肽酶1(HTRA1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
Anti-SREBP-1/FITC 熒光素標(biāo)記膽固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體IgG綿羊血管**素4(ANGPT4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
Anti-SREBP-2/FITC 熒光素標(biāo)記膽固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體IgG綿羊脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
CT-26細(xì)胞補(bǔ)體片斷5aElisa試劑盒人素βG protein beta subunit GI G蛋白/鳥苷結(jié)合蛋白抗體
不對(duì)稱二精氨Elisa試劑盒大鼠胞漿型脂酶A2G protein beta 4/GNB4 G蛋白β4抗體/鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞4
層粘連蛋白Elisa試劑盒人素αG protein beta 3/GNB3 G蛋白β3抗體/鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞3
叉頭框蛋白01Elisa試劑盒魚類狀腺原氨G protein beta 2/GNB2 G蛋白β2抗體/鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞2
叉頭型因P3Elisa試劑盒兔胰淀素G protein beta 1/GNB1 G蛋白β1抗體/鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞1
腸三葉因子Elisa試劑盒小鼠小扁豆素結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體2G protein alpha S G蛋白αS抗體(鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白Gα s)
腸脂肪結(jié)合蛋白Elisa試劑盒大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧末端肽G protein alpha Inhibitor 2 G蛋白α抑制蛋白2抗體
超敏C反應(yīng)蛋白Elisa試劑盒大鼠肌鈣蛋白TG Protein alpha Inhibitor 1 G蛋白α抑制蛋白1抗體
超氧化物歧化酶Elisa試劑盒兔心肌肌鈣蛋白ⅠG protein alpha G蛋白α抗體
- 溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)與產(chǎn)品質(zhì)量。
- 免責(zé)申明:以上內(nèi)容為注冊(cè)會(huì)員自行發(fā)布,若信息的真實(shí)性、合法性存在爭(zhēng)議,平臺(tái)將會(huì)監(jiān)督協(xié)助處理,歡迎舉報(bào)