產(chǎn)品名稱:
生長特性:懸浮生長
特征特性:該細(xì)胞是源自C57BL/6的細(xì)胞毒性的T細(xì)胞。其生長以來IL-2。檢測(cè)發(fā)現(xiàn)對(duì)IL2的依賴性不強(qiáng)
培養(yǎng)條件:RPMI1640+100U/mlrmIL-2(重組小鼠白介素-2)+10%FBS
傳代方法:1:2傳代
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號(hào)
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CTLL-2細(xì)胞
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T25
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FS-X3542
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公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
CD44變體6(CD44-v6)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:CD44-v6 ELISA Kit,英文縮寫:CD44-v6,產(chǎn)品別名:CD44變體6(CD44-v6)ELISA檢測(cè)試劑盒,CD44變體6(CD44-v6)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:ⅠCTP ELISA Kit,英文縮寫:ⅠCTP,產(chǎn)品別名:Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA檢測(cè)試劑盒,Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:BAX ELISA Kit,英文縮寫:BAX,產(chǎn)品別名:Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA檢測(cè)試劑盒,Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
1型1-磷酸鞘氨醇受體(S1P1)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:S1P1 ELISA Kit,英文縮寫:S1P1,產(chǎn)品別名:1型1-磷酸鞘氨醇受體(S1P1)ELISA檢測(cè)試劑盒,1型1-磷酸鞘氨醇受體(S1P1)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
糖蛋白130(gp130/CD130)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:gp130/CD130 ELISA Kit,英文縮寫:gp130/CD130,產(chǎn)品別名:糖蛋白130(gp130/CD130)ELISA檢測(cè)試劑盒,糖蛋白130(gp130/CD130)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
表皮生長因子受體2(Her2)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:Her2 ELISA Kit,英文縮寫:Her2,產(chǎn)品別名:表皮生長因子受體2(Her2)ELISA檢測(cè)試劑盒,表皮生長因子受體2(Her2)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
CD80分子(CD80/B7-1)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:CD80/B7-1 ELISA Kit,英文縮寫:CD80/B7-1,產(chǎn)品別名:CD80分子(CD80/B7-1)ELISA檢測(cè)試劑盒,CD80分子(CD80/B7-1)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
組氨酸豐富鈣結(jié)合蛋白(HRC)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:HRC ELISA Kit,英文縮寫:HRC,產(chǎn)品別名:組氨酸豐富鈣結(jié)合蛋白(HRC)ELISA檢測(cè)試劑盒,組氨酸豐富鈣結(jié)合蛋白(HRC)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFα)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:TGFα ELISA Kit,英文縮寫:TGFα,產(chǎn)品別名:轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFα)ELISA檢測(cè)試劑盒,轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFα)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
中性粒細(xì)胞明膠酶關(guān)聯(lián)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:NGAL ELISA Kit,英文縮寫:NGAL,產(chǎn)品別名:中性粒細(xì)胞明膠酶關(guān)聯(lián)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA檢測(cè)試劑盒,中性粒細(xì)胞明膠酶關(guān)聯(lián)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
脂肪酶I(LIPI)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:LIPI ELISA Kit,英文縮寫:LIPI,產(chǎn)品別名:脂肪酶I(LIPI)ELISA檢測(cè)試劑盒,脂肪酶I(LIPI)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
CTLL-2細(xì)胞VDAC 等電壓依賴性陰離子通道抗體規(guī)格 0.2ml
VCP 含纈酪肽蛋白抗體規(guī)格 0.1ml
VCAM-1/CD106/L1CAM 血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子抗體規(guī)格 0.1ml
VCAM-1 血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子抗體規(guī)格 0.1ml
VAV3 鳥嘌呤核苷酸交換因子VAV3抗體規(guī)格 0.2ml
VAV2 癌基因VAV2抗體規(guī)格 0.2ml
VAV1 鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體規(guī)格 0.2ml