產(chǎn)品名稱:豬睪丸細胞系;ST
形態(tài)特性:上皮細胞樣
生長特性:貼壁生長
特征特性:ST細胞系建系于1960年(Mcclurkin,AW,etal)。ST細胞一般用于病毒增殖和分離,是豬細小病毒的理想宿主,可用于這類病毒的分離及增殖。
培養(yǎng)條件:DMEM(高糖)+10%FBS
傳代方法:1:3傳代,2-3天傳一代
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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ST細胞
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T25
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FS-X3584
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凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
蛋白L-異天冬氨酸-O-甲基轉移酶(PCMT1)elisa檢測試劑盒英文名稱:PCMT1 ELISA Kit,英文縮寫:PCMT1,產(chǎn)品別名:蛋白L-異天冬氨酸-O-甲基轉移酶(PCMT1)ELISA檢測試劑盒,蛋白L-異天冬氨酸-O-甲基轉移酶(PCMT1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
沉默調節(jié)蛋白7(SIRT7)elisa檢測試劑盒英文名稱:SIRT7 ELISA Kit,英文縮寫:SIRT7,產(chǎn)品別名:沉默調節(jié)蛋白7(SIRT7)ELISA檢測試劑盒,沉默調節(jié)蛋白7(SIRT7)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
促腎上腺皮質素釋放結合蛋白(CRHBP)elisa檢測試劑盒英文名稱:CRHBP ELISA Kit,英文縮寫:CRHBP,產(chǎn)品別名:促腎上腺皮質素釋放結合蛋白(CRHBP)ELISA檢測試劑盒,促腎上腺皮質素釋放結合蛋白(CRHBP)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
補體受體2(CR2)elisa檢測試劑盒英文名稱:CR2 ELISA Kit,英文縮寫:CR2,產(chǎn)品別名:補體受體2(CR2)ELISA檢測試劑盒,補體受體2(CR2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
表面活性物質關聯(lián)蛋白A(SPA)elisa檢測試劑盒英文名稱:SPA ELISA Kit,英文縮寫:SPA,產(chǎn)品別名:表面活性物質關聯(lián)蛋白A(SPA)ELISA檢測試劑盒,表面活性物質關聯(lián)蛋白A(SPA)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
半乳糖凝集素9(GAL9)elisa檢測試劑盒英文名稱:GAL9 ELISA Kit,英文縮寫:GAL9,產(chǎn)品別名:半乳糖凝集素9(GAL9)ELISA檢測試劑盒,半乳糖凝集素9(GAL9)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
白細胞關聯(lián)球蛋白樣受體1(LAIR1)elisa檢測試劑盒英文名稱:LAIR1 ELISA Kit,英文縮寫:LAIR1,產(chǎn)品別名:白細胞關聯(lián)球蛋白樣受體1(LAIR1)ELISA檢測試劑盒,白細胞關聯(lián)球蛋白樣受體1(LAIR1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
白介素1受體關聯(lián)激酶2(IRAK2)elisa檢測試劑盒英文名稱:IRAK2 ELISA Kit,英文縮寫:IRAK2,產(chǎn)品別名:白介素1受體關聯(lián)激酶2(IRAK2)ELISA檢測試劑盒,白介素1受體關聯(lián)激酶2(IRAK2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
氨基乙二酸轉氨酶(AADAT)elisa檢測試劑盒英文名稱:AADAT ELISA Kit,英文縮寫:AADAT,產(chǎn)品別名:氨基乙二酸轉氨酶(AADAT)ELISA檢測試劑盒,氨基乙二酸轉氨酶(AADAT)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
β-促脂素(βLPH)elisa檢測試劑盒英文名稱:βLPH ELISA Kit,英文縮寫:βLPH,產(chǎn)品別名:β-促脂素(βLPH)ELISA檢測試劑盒,β-促脂素(βLPH)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
V-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病癌基因同源物B(RELB)elisa檢測試劑盒英文名稱:RELB ELISA Kit,英文縮寫:RELB,產(chǎn)品別名:V-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病癌基因同源物B(RELB)ELISA檢測試劑盒,V-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病癌基因同源物B(RELB)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
ST細胞TNR/Tenascin-R 腱糖蛋白R抗體規(guī)格 0.2ml
TNNI3K 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶TNN13K抗體規(guī)格 0.2ml
TNMD/tenomodulin 腱調蛋白抗體(軟骨調節(jié)素樣1蛋白)規(guī)格 0.2ml
TNK1 非受體型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗體規(guī)格 0.1ml
TNIP2/ABIN2/TNFAIP3 interacting protein 2 腫瘤壞死因子α誘導蛋白3相互作用蛋白2抗體規(guī)格 0.2ml
TNIK TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗體規(guī)格 0.2ml
TNFSF9 腫瘤壞死因子配體超家族成員9抗體規(guī)格 0.1ml
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