實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

產(chǎn)品名稱：大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化)；PCS-12(低分化)
形態(tài)特性：多角形

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

特征特性：該細(xì)胞系來自能移植的雄性大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤。這些細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)受體。NGF可誘導(dǎo)產(chǎn)生神經(jīng)表型。這些細(xì)胞不合成腎上腺素。

培養(yǎng)條件：1640+10%馬血清+5%胎牛血清

傳代方法：消化CQ-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱：CTXⅠ ELISA Kit，英文縮寫：CTXⅠ，產(chǎn)品別名：Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)ELISA檢測(cè)試劑盒，Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

組織因子途徑抑制物(TFPI)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱：TFPI ELISA Kit，英文縮寫：TFPI，產(chǎn)品別名：組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA檢測(cè)試劑盒，組織因子途徑抑制物(TFPI)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

43kDa核孔蛋白(NUP43)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱：NUP43 ELISA Kit，英文縮寫：NUP43，產(chǎn)品別名：43kDa核孔蛋白(NUP43)ELISA檢測(cè)試劑盒，43kDa核孔蛋白(NUP43)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體2(TGFβR2)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱：TGFβR2 ELISA Kit，英文縮寫：TGFβR2，產(chǎn)品別名：轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體2(TGFβR2)ELISA檢測(cè)試劑盒，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體2(TGFβR2)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

腫瘤壞死因子β(TNFβ)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱：TNFβ ELISA Kit，英文縮寫：TNFβ，產(chǎn)品別名：腫瘤壞死因子β(TNFβ)ELISA檢測(cè)試劑盒，腫瘤壞死因子β(TNFβ)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱：LAM ELISA Kit，英文縮寫：LAM，產(chǎn)品別名：脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA檢測(cè)試劑盒，脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

孕烯醇酮(PREG)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱：PREG ELISA Kit，英文縮寫：PREG，產(chǎn)品別名：孕烯醇酮(PREG)ELISA檢測(cè)試劑盒，孕烯醇酮(PREG)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱：hnRNP K ELISA Kit，英文縮寫：hnRNP K，產(chǎn)品別名：異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)ELISA檢測(cè)試劑盒，異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱：IGFBP-5 ELISA Kit，英文縮寫：IGFBP-5，產(chǎn)品別名：胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)ELISA檢測(cè)試劑盒，胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

循環(huán)復(fù)合物(CIC)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱：CIC ELISA Kit，英文縮寫：CIC，產(chǎn)品別名：循環(huán)復(fù)合物(CIC)ELISA檢測(cè)試劑盒，循環(huán)復(fù)合物(CIC)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

血清/糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激酶2(SGK2)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱：SGK2 ELISA Kit，英文縮寫：SGK2，產(chǎn)品別名：血清/糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激酶2(SGK2)ELISA檢測(cè)試劑盒，血清/糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激酶2(SGK2)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
PCS-12(低分化)細(xì)胞TdT/DNTT  末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶抗體規(guī)格 0.2ml

TDRD9/HIG1  缺氧誘導(dǎo)蛋白HIG1抗體規(guī)格 0.2ml

TDP-43  Tar DNA 結(jié)合蛋白43抗體規(guī)格 0.1ml

TCTP  翻譯控制腫瘤蛋白抗體規(guī)格 0.1ml

TCRG  T細(xì)胞受體γ抗體規(guī)格 0.2ml

TCN2/Transcobalamin II  轉(zhuǎn)鈷胺素蛋白2抗體規(guī)格 0.2ml

TCHP  抑癌蛋白TCHP抗體規(guī)格 0.2ml
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。