實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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KURAMOCHI細胞
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T25
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FS-X3618
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產(chǎn)品名稱:卵巢癌細胞
形態(tài)特性:上皮樣
生長特性:貼壁生長
培養(yǎng)條件:RPMI1640mediumwith10%fetalcalfserum
傳代方法:1:10傳代:每周換液2-3次
公司細胞現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
AMPA離子能谷氨酸受體4(GRIA4)elisa檢測試劑盒英文名稱:GRIA4 ELISA Kit,英文縮寫:GRIA4,產(chǎn)品別名:AMPA離子能谷氨酸受體4(GRIA4)ELISA檢測試劑盒,AMPA離子能谷氨酸受體4(GRIA4)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
5-羥色胺受體1A(HTR1A)elisa檢測試劑盒英文名稱:HTR1A ELISA Kit,英文縮寫:HTR1A,產(chǎn)品別名:5-羥色胺受體1A(HTR1A)ELISA檢測試劑盒,5-羥色胺受體1A(HTR1A)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
Ⅱ型前膠原(PCⅡ)elisa檢測試劑盒英文名稱:PCⅡ ELISA Kit,英文縮寫:PCⅡ,產(chǎn)品別名:Ⅱ型前膠原(PCⅡ)ELISA檢測試劑盒,Ⅱ型前膠原(PCⅡ)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
10kDa干擾素γ誘導蛋白(IP10)elisa檢測試劑盒英文名稱:IP10 ELISA Kit,英文縮寫:IP10,產(chǎn)品別名:10kDa干擾素γ誘導蛋白(IP10)ELISA檢測試劑盒,10kDa干擾素γ誘導蛋白(IP10)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)elisa檢測試劑盒英文名稱:TFR/CD71 ELISA Kit,英文縮寫:TFR/CD71,產(chǎn)品別名:轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA檢測試劑盒,轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)elisa檢測試劑盒英文名稱:TRAIL-R1 ELISA Kit,英文縮寫:TRAIL-R1,產(chǎn)品別名:腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)ELISA檢測試劑盒,腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)elisa檢測試劑盒英文名稱:ADRP ELISA Kit,英文縮寫:ADRP,產(chǎn)品別名:脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA檢測試劑盒,脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
載脂蛋白C2(Apo-C2)elisa檢測試劑盒英文名稱:Apo-C2 ELISA Kit,英文縮寫:Apo-C2,產(chǎn)品別名:載脂蛋白C2(Apo-C2)ELISA檢測試劑盒,載脂蛋白C2(Apo-C2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
抑制素β-A(INHBA)elisa檢測試劑盒英文名稱:INHBA ELISA Kit,英文縮寫:INHBA,產(chǎn)品別名:抑制素β-A(INHBA)ELISA檢測試劑盒,抑制素β-A(INHBA)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
胰高血糖素(GC)elisa檢測試劑盒英文名稱:GC ELISA Kit,英文縮寫:GC,產(chǎn)品別名:胰高血糖素(GC)ELISA檢測試劑盒,胰高血糖素(GC)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)elisa檢測試劑盒英文名稱:OxLDL ELISA Kit,英文縮寫:OxLDL,產(chǎn)品別名:氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA檢測試劑盒,氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
KURAMOCHI細胞SUR1 磺酰脲類受體1抗體規(guī)格 0.1ml
SUPT16H/CDC68 染色體特異性轉(zhuǎn)錄延伸因子抗體規(guī)格 0.2ml
SUMO-1/UBC9 泛素蛋白連接酶E2I抗體規(guī)格 0.2ml
SUMO 1 類泛素蛋白抗體規(guī)格 0.1ml
SULT2A1 膽鹽磺基轉(zhuǎn)移酶規(guī)格 0.1ml
SULT1E1/Estrogen Sulfotranferase 雌硫酸轉(zhuǎn)移酶抗體規(guī)格 0.1ml
SULT1A1 芳基磺基轉(zhuǎn)移酶1抗體規(guī)格 0.2ml
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。