產(chǎn)品名稱:乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
形態(tài)特性:上皮樣
生長特性:貼壁生長
培養(yǎng)條件:RPMI-1640+10%FBS
1:2~1:4傳代,每周換液2~3次
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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HCC1143細(xì)胞
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T25
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FS-X3686
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公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍???培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
催產(chǎn)素(OT)elisa檢測試劑盒英文名稱:OT ELISA Kit,英文縮寫:OT,產(chǎn)品別名:催產(chǎn)素(OT)ELISA檢測試劑盒,催產(chǎn)素(OT)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
補體C5a(C5a)elisa檢測試劑盒英文名稱:C5a ELISA Kit,英文縮寫:C5a,產(chǎn)品別名:補體C5a(C5a)ELISA檢測試劑盒,補體C5a(C5a)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
成纖維細(xì)胞生長因子13(FGF-13)elisa檢測試劑盒英文名稱:FGF-13 ELISA Kit,英文縮寫:FGF-13,產(chǎn)品別名:成纖維細(xì)胞生長因子13(FGF-13)ELISA檢測試劑盒,成纖維細(xì)胞生長因子13(FGF-13)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
本周蛋白(BJP)elisa檢測試劑盒英文名稱:BJP ELISA Kit,英文縮寫:BJP,產(chǎn)品別名:本周蛋白(BJP)ELISA檢測試劑盒,本周蛋白(BJP)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
白介素32(IL-32)elisa檢測試劑盒英文名稱:IL-32 ELISA Kit,英文縮寫:IL-32,產(chǎn)品別名:白介素32(IL-32)ELISA檢測試劑盒,白介素32(IL-32)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
白介素12(IL-12/P70)elisa檢測試劑盒英文名稱:IL-12/P70 ELISA Kit,英文縮寫:IL-12/P70,產(chǎn)品別名:白介素12(IL-12/P70)ELISA檢測試劑盒,白介素12(IL-12/P70)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
β乳球蛋白(β-Lg)elisa檢測試劑盒英文名稱:β-Lg ELISA Kit,英文縮寫:β-Lg,產(chǎn)品別名:β乳球蛋白(β-Lg)ELISA檢測試劑盒,β乳球蛋白(β-Lg)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)elisa檢測試劑盒英文名稱:β2-GP1 Ab IgA ELISA Kit,英文縮寫:β2-GP1 Ab IgA,產(chǎn)品別名:β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)ELISA檢測試劑盒,β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
v-rel禽網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞過多癥病癌基因同源物B(RelB)elisa檢測試劑盒英文名稱:RelB ELISA Kit,英文縮寫:RelB,產(chǎn)品別名:v-rel禽網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞過多癥病癌基因同源物B(RelB)ELISA檢測試劑盒,v-rel禽網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞過多癥病癌基因同源物B(RelB)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
S100鈣結(jié)合蛋白A6/鈣粒蛋白A(S100A6)elisa檢測試劑盒英文名稱:S100A6 ELISA Kit,英文縮寫:S100A6,產(chǎn)品別名:S100鈣結(jié)合蛋白A6/鈣粒蛋白A(S100A6)ELISA檢測試劑盒,S100鈣結(jié)合蛋白A6/鈣粒蛋白A(S100A6)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
MYC誘導(dǎo)核抗原(MINA)elisa檢測試劑盒英文名稱:MINA ELISA Kit,英文縮寫:MINA,產(chǎn)品別名:MYC誘導(dǎo)核抗原(MINA)ELISA檢測試劑盒,MYC誘導(dǎo)核抗原(MINA)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
HCC1143細(xì)胞RRAGC RAS相關(guān)GTP結(jié)合蛋白C抗體規(guī)格 0.2ml
RRAGA RAS相關(guān)GTP結(jié)合蛋白A抗體規(guī)格 0.2ml
RRAD RRAD抗體規(guī)格 0.2ml
RPUSD2 RNA尿苷酸合酶結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體規(guī)格 0.2ml
RPS6KB1 核糖體S6蛋白激酶抗體規(guī)格 0.1ml
RPS6KA1/p90RSK/RSK1 絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體規(guī)格 0.1ml
RPS6 S6核糖體蛋白抗體規(guī)格 0.1ml