冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

產(chǎn)品名稱：乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)條件：RPMI-1640+10%FBS

傳代方法：1:2~1:3傳代；每周換液2~3次。

培養(yǎng)操作：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.

公司優(yōu)勢：

1.具有多年的銷售經(jīng)驗(yàn)的行業(yè)背景，我司秉承質(zhì)量優(yōu)先的理念，希望廣大科研工作者與我司達(dá)成長期的合作關(guān)系；

2.公司不僅與各大高校、科研機(jī)構(gòu)以及**性企業(yè)有著合作關(guān)系，還與國際接軌，我司代理多種知名的國際品牌，如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa，Abnova，GenWay等。

相關(guān)熱銷產(chǎn)品：

抑制素(INH)elisa檢測試劑盒英文名稱：INH ELISA Kit，英文縮寫：INH，產(chǎn)品別名：抑制素(INH)ELISA檢測試劑盒，抑制素(INH)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

氧化低密度脂蛋白(OxLDL)elisa檢測試劑盒英文名稱：OxLDL ELISA Kit，英文縮寫：OxLDL，產(chǎn)品別名：氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA檢測試劑盒，氧化低密度脂蛋白(OxLDL)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

胰淀粉酶(PAMY)elisa檢測試劑盒英文名稱：PAMY ELISA Kit，英文縮寫：PAMY，產(chǎn)品別名：胰淀粉酶(PAMY)ELISA檢測試劑盒，胰淀粉酶(PAMY)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

血清素/血清胺(ST)elisa檢測試劑盒英文名稱：ST ELISA Kit，英文縮寫：ST，產(chǎn)品別名：血清素/血清胺(ST)ELISA檢測試劑盒，血清素/血清胺(ST)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)elisa檢測試劑盒英文名稱：VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit，英文縮寫：VEGFR-2/Flk-1，產(chǎn)品別名：血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA檢測試劑盒，血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)elisa檢測試劑盒英文名稱：TP ELISA Kit，英文縮寫：TP，產(chǎn)品別名：胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA檢測試劑盒，胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2(ABCG2)elisa檢測試劑盒英文名稱：ABCG2 ELISA Kit，英文縮寫：ABCG2，產(chǎn)品別名：腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2(ABCG2)ELISA檢測試劑盒，腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2(ABCG2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

細(xì)胞色素C(Cyt-C)elisa檢測試劑盒英文名稱：Cyt-C ELISA Kit，英文縮寫：Cyt-C，產(chǎn)品別名：細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA檢測試劑盒，細(xì)胞色素C(Cyt-C)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

胃泌素(GAS)elisa檢測試劑盒英文名稱：GAS ELISA Kit，英文縮寫：GAS，產(chǎn)品別名：胃泌素(GAS)ELISA檢測試劑盒，胃泌素(GAS)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)elisa檢測試劑盒英文名稱：DPD ELISA Kit，英文縮寫：DPD，產(chǎn)品別名：脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)ELISA檢測試劑盒，脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

糖磷脂酰肌醇(GPI)elisa檢測試劑盒英文名稱：GPI ELISA Kit，英文縮寫：GPI，產(chǎn)品別名：糖磷脂酰肌醇(GPI)ELISA檢測試劑盒，糖磷脂酰肌醇(GPI)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。
HCC1419細(xì)胞RORB  維甲酸相關(guān)孤兒受體β抗體規(guī)格 0.2ml

ROR1/ROR alpha  維甲酸相關(guān)孤兒受體α抗體規(guī)格 0.2ml

ROR Gamma/RORC/NR1F3  孤兒核受體抗體規(guī)格 0.2ml

Ron  原癌基因c-Met相關(guān)酪氨酸激酶抗體規(guī)格 0.1ml

ROM-K/KCNJ1  ATP調(diào)節(jié)鉀離子通道ROM K抗體規(guī)格 0.2ml

ROM1  視網(wǎng)膜感光細(xì)胞外節(jié)膜蛋白1抗體規(guī)格 0.2ml

ROCK2  Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體規(guī)格 0.1ml
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器備。

產(chǎn)品留言

標(biāo)題

聯(lián)系人

聯(lián)系電話

內(nèi)容

驗(yàn)證碼

點(diǎn)擊換一張

注：1.可以使用快捷鍵Alt+S或Ctrl+Enter發(fā)送信息!
2.如有必要,請您留下您的詳細(xì)聯(lián)系方式!