產(chǎn)品名稱:盲腸癌細(xì)胞
形態(tài)特性:上皮樣
生長特性:貼壁生長
培養(yǎng)條件:RPMI-1640+10%FBS
傳代方法:1:3~1:4傳代,每周換液2次
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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LS513細(xì)胞
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T25
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FS-X3710
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公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存??養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Dickkopf相關(guān)蛋白1(DKK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforDickkopfRelatedProtein1(DKK1) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
微管蛋白β3(TUBβ3)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforTubulinBeta3(TUBb3) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
趨化因子C-C-基元受體5(CCR5)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforChemokineC-C-MotifReceptor5(CCR5) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
淀粉酶α(Amyα)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforAmylaseAlpha(Amya) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
基質(zhì)金屬蛋白酶14(MMP14)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforMatrixMetalloproteinase14(MMP14) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
腫瘤壞死因子β(TNFβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforTumorNecrosisFactorBeta(TNFb) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
紡錘體蛋白1(SPIN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforSpindlin1(SPIN1) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
過氧化還原酶1(PRDX1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforPeroxiredoxin1(PRDX1) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
蛋白酪氨酸磷酸酶受體H(PTPRH)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforProteinTyrosinePhosphataseReceptorTypeH(PTPRH) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
酸性磷酸酶1(ACP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforAcidPhosphatase1(ACP1) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
LS513細(xì)胞Reg3a 胰島β細(xì)胞生長因子抗體規(guī)格 0.2ml
Reg3 gamma 胰島β細(xì)胞生長因子Reg IIIγ抗體規(guī)格 0.2ml
Reg3 beta 胰島β細(xì)胞生長因子Reg IIIα 抗體規(guī)格 0.2ml
REG1β/REG1 beta 胰島再生因子β抗體規(guī)格 0.2ml
REG1A 胰島再生因子ICRF抗體規(guī)格 0.2ml
REF-1/APEX1 多功能DNA修復(fù)酶抗體規(guī)格 0.1ml
REEP5 受體表達(dá)蛋白5/息肉相關(guān)蛋白抗體規(guī)格 0.2ml