公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱：乳腺癌細(xì)胞
形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)條件：DMEM+10%FBS

傳代方法：1:2～1:4傳代，每周換液2～3次
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 

酪氨酸3/色氨酸5單加氧酶激活蛋白ζ(YWHAζ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)  ELISAKitforTyrosine3/Tryptophan5MonooxygenaseActivationProteinZeta(YWHAz)  規(guī)格：48T/96T  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

核糖核酸酶T2(RNASET2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)  ELISAKitforRibonucleaseT2(RNASET2)  規(guī)格：48T/96T  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

Ⅲ型前膠原氨基端原肽(PⅢNP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)  ELISAKitforProcollagenIIIN-TerminalPropeptide(PIIINP)  規(guī)格：48T/96T  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)  ELISAKitforUncouplingProtein1,Mitochondrial(UCP1)  規(guī)格：48T/96T  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

肌侵蛋白(MTPN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)  ELISAKitforMyotrophin(MTPN)  規(guī)格：48T/96T  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

Pianissimo蛋白(PIA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)  ELISAKitforPianissimo(PIA)  規(guī)格：48T/96T  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(RUNX2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)  ELISAKitforRuntRelatedTranscriptionFactor2(RUNX2)  規(guī)格：48T/96T  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)  ELISAKitforHepatocyteGrowthFactor(HGF)  規(guī)格：48T/96T  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)  ELISAKitforVascularEndothelialGrowthFactorReceptor1(VEGFR1)  規(guī)格：48T/96T  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

富酪蛋白(STATH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)  ELISAKitforStatherin(STATH)  規(guī)格：48T/96T  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
Hs742.T細(xì)胞RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S5)  磷酸化RNA聚合酶II CTD抗體規(guī)格 0.1ml

RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S2)  磷酸化RNA聚合酶II CTD抗體規(guī)格 0.1ml

RMND5B  RMND5B蛋白抗體規(guī)格 0.2ml

RMND1  減數(shù)分裂同源蛋白1抗體規(guī)格 0.2ml

RLLM1/C14orf166  胰腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白R(shí)LLM1抗體規(guī)格 0.2ml

RLBP1L1  視黃醛結(jié)合蛋白1抗體規(guī)格 0.2ml

RKIP/PBP  磷脂酰乙醇胺結(jié)合蛋白1抗體規(guī)格 0.1ml

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