公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。
產(chǎn)品名稱(chēng)
|
規(guī)格
|
貨號(hào)
|
SNU-C2A細(xì)胞
|
T25
|
FS-X3721
|
產(chǎn)品名稱(chēng):結(jié)腸癌細(xì)胞
形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性:松散附著、多單元的聚合
培養(yǎng)條件:ACL-4medium(serum-free)
傳代方法:每周兩次換液
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3A(DNMT3A)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):DNMT3A ELISA Kit,英文縮寫(xiě):DNMT3A,產(chǎn)品別名:DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3A(DNMT3A)ELISA檢測(cè)試劑盒,DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3A(DNMT3A)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):AGRP ELISA Kit,英文縮寫(xiě):AGRP,產(chǎn)品別名:Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA檢測(cè)試劑盒,Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
CD134分子(CD134)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):CD134 ELISA Kit,英文縮寫(xiě):CD134,產(chǎn)品別名:CD134分子(CD134)ELISA檢測(cè)試劑盒,CD134分子(CD134)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
8-羥基鳥(niǎo)嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):OGG1 ELISA Kit,英文縮寫(xiě):OGG1,產(chǎn)品別名:8-羥基鳥(niǎo)嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)ELISA檢測(cè)試劑盒,8-羥基鳥(niǎo)嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
12-脂氧化酶/脂加氧酶(LOX-12)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):LOX-12 ELISA Kit,英文縮寫(xiě):LOX-12,產(chǎn)品別名:12-脂氧化酶/脂加氧酶(LOX-12)ELISA檢測(cè)試劑盒,12-脂氧化酶/脂加氧酶(LOX-12)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):GROα/CXCL1/MGSA ELISA Kit,英文縮寫(xiě):GROα/CXCL1/MGSA,產(chǎn)品別名:生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA檢測(cè)試劑盒,生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
白細(xì)胞介素4(IL-4)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):IL-4 ELISA Kit,英文縮寫(xiě):IL-4,產(chǎn)品別名:白細(xì)胞介素4(IL-4)ELISA檢測(cè)試劑盒,白細(xì)胞介素4(IL-4)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):TIMP1 ELISA Kit,英文縮寫(xiě):TIMP1,產(chǎn)品別名:組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)ELISA檢測(cè)試劑盒,組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(TNPO2)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):TNPO2 ELISA Kit,英文縮寫(xiě):TNPO2,產(chǎn)品別名:轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(TNPO2)ELISA檢測(cè)試劑盒,轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(TNPO2)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
蛛素受體1(LPHN1)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):LPHN1 ELISA Kit,英文縮寫(xiě):LPHN1,產(chǎn)品別名:蛛素受體1(LPHN1)ELISA檢測(cè)試劑盒,蛛素受體1(LPHN1)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
中間密度脂蛋白(IDL)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):IDL ELISA Kit,英文縮寫(xiě):IDL,產(chǎn)品別名:中間密度脂蛋白(IDL)ELISA檢測(cè)試劑盒,中間密度脂蛋白(IDL)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
SNU-C2A細(xì)胞RALDH2 視黃醛脫氫酶2型抗體規(guī)格 0.1ml
RALB Ras樣蛋白B抗體規(guī)格 0.2ml
RALA+RALB Ras樣蛋白A+B抗體規(guī)格 0.2ml
RALA Ras樣蛋白A抗體規(guī)格 0.2ml
RAIDD CASP2凋亡相關(guān)蛋白抗體規(guī)格 0.1ml
RAG2 重組激活基因2蛋白抗體規(guī)格 0.2ml
RAG1/RNF74 環(huán)指蛋白74抗體(重組激活基因1)規(guī)格 0.2ml