實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

產(chǎn)品名稱：小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞
形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞

生長特性：貼壁生長

CT26細(xì)胞是被N-亞硝基-N-甲基脲烷（NNMU）誘導(dǎo)得到的未分???的小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞，該細(xì)胞的一個克隆形成的細(xì)胞系被命名為CT26.WT。CT26.WT被逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉(zhuǎn)化形成了一個致死性的亞克隆CT26.CL25，這一病毒載體含有l(wèi)acZ基因、編碼腫瘤相關(guān)抗原（TAA）和beta半乳糖苷酶。CT26.WT和CT26.CL25細(xì)胞在小鼠中生長速度和致死率都很相似，不同的是CT26.CL25細(xì)胞可以表達腫瘤相關(guān)抗原和beta半乳糖苷酶，因此這兩株細(xì)胞可以聯(lián)合用于和宿主反應(yīng)的研究。

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

1:4~1:10傳代，2~3天換液1次。

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
顆粒體蛋白(GRN)elisa檢測試劑盒英文名稱：GRN ELISA Kit，英文縮寫：GRN，產(chǎn)品別名：顆粒體蛋白(GRN)ELISA檢測試劑盒，顆粒體蛋白(GRN)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體(RANA)elisa檢測試劑盒英文名稱：RANA ELISA Kit，英文縮寫：RANA，產(chǎn)品別名：人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體(RANA)ELISA檢測試劑盒，人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體(RANA)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(anti-MCV Ab)elisa檢測試劑盒英文名稱：anti-MCV Ab ELISA Kit，英文縮寫：anti-MCV Ab，產(chǎn)品別名：人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(anti-MCV Ab)ELISA檢測試劑盒，人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(anti-MCV Ab)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

人抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)elisa檢測試劑盒英文名稱：PM-Scl/PM-1 ELISA Kit，英文縮寫：PM-Scl/PM-1，產(chǎn)品別名：人抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)ELISA檢測試劑盒，人抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)elisa檢測試劑盒英文名稱：M-CSF ELISA Kit，英文縮寫：M-CSF，產(chǎn)品別名：巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA檢測試劑盒，巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

膠原凝集素(Collectin)elisa檢測試劑盒英文名稱：Collectin ELISA Kit，英文縮寫：Collectin，產(chǎn)品別名：膠原凝集素(Collectin)ELISA檢測試劑盒，膠原凝集素(Collectin)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

集落刺激因子(CSF)elisa檢測試劑盒英文名稱：CSF ELISA Kit，英文縮寫：CSF，產(chǎn)品別名：集落刺激因子(CSF)ELISA檢測試劑盒，集落刺激因子(CSF)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)elisa檢測試劑盒英文名稱：MMP11 ELISA Kit，英文縮寫：MMP11，產(chǎn)品別名：基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA檢測試劑盒，基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

環(huán)孢素A(CsA)elisa檢測試劑盒英文名稱：CsA ELISA Kit，英文縮寫：CsA，產(chǎn)品別名：環(huán)孢素A(CsA)ELISA檢測試劑盒，環(huán)孢素A(CsA)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

過氧化脂質(zhì)(LPO)elisa檢測試劑盒英文名稱：LPO ELISA Kit，英文縮寫：LPO，產(chǎn)品別名：過氧化脂質(zhì)(LPO)ELISA檢測試劑盒，過氧化脂質(zhì)(LPO)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)elisa檢測試劑盒英文名稱：BMPR-Ⅱ ELISA Kit，英文縮寫：BMPR-Ⅱ，產(chǎn)品別名：骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA檢測試劑盒，骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。
CT26.WT細(xì)胞RAD50  DNA修復(fù)蛋白Rad50抗體規(guī)格 0.2ml

RAD21  核基質(zhì)蛋白21抗體規(guī)格 0.2ml

Rad17/RFC  細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體（復(fù)制因子C）規(guī)格 0.1ml

Ractopamine /PAYLEAN (1B12)  小鼠抗萊克多巴胺單克隆抗體規(guī)格 0.2ml

RACK1  受體激活蛋白激酶C1抗體規(guī)格 0.2ml

RACGAP1  Rho GTP酶激活蛋白GAP抗體規(guī)格 0.2ml

RAC2  G蛋白P21 RAC2抗體規(guī)格 0.2ml
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

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