公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號(hào)
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NCI-H596細(xì)胞
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T25
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FS-X3782
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產(chǎn)品名稱:肺腺鱗癌細(xì)胞
形態(tài)特性:上皮樣
生長特性:貼壁生長
該細(xì)胞是1983年由GazdarAF和OieH從一名患有肺腺鱗癌的73歲白人男性患者的胸壁腫物中分離得到;腫塊的獲取先于。該細(xì)胞表達(dá)與正常肺組織水平相當(dāng)?shù)膒53,沒有大的結(jié)構(gòu)DNA的異常。角蛋白和波形蛋白陽性,神經(jīng)絲三聯(lián)蛋白陰性;表達(dá)多種鱗狀細(xì)胞分化標(biāo)志,如谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶活性、被膜素的產(chǎn)生和交聯(lián)包膜的形成。
培養(yǎng)條件:RPMI1640+10%FBS
傳代方法: 1:4~1:8傳代;每周換液2~3次。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
β黑色素細(xì)胞刺(β-MSH)elisa檢測試劑盒英文名稱:β-MSH ELISA Kit,英文縮寫:β-MSH,產(chǎn)品別名:β黑色素細(xì)胞刺(β-MSH)ELISA檢測試劑盒,β黑色素細(xì)胞刺(β-MSH)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
Toll樣受體5(TLR5)elisa檢測試劑盒英文名稱:TLR5 ELISA Kit,英文縮寫:TLR5,產(chǎn)品別名:Toll樣受體5(TLR5)ELISA檢測試劑盒,Toll樣受體5(TLR5)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
α干擾素(IFN-α)elisa檢測試劑盒英文名稱:IFN-α ELISA Kit,英文縮寫:IFN-α,產(chǎn)品別名:α干擾素(IFN-α)ELISA檢測試劑盒,α干擾素(IFN-α)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
P選擇素(P-Selectin)elisa檢測試劑盒英文名稱:P-Selectin ELISA Kit,英文縮寫:P-Selectin,產(chǎn)品別名:P選擇素(P-Selectin)ELISA檢測試劑盒,P選擇素(P-Selectin)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
I 型膠原蛋白(COL I)elisa檢測試劑盒英文名稱:COL I ELISA Kit,英文縮寫:COL I,產(chǎn)品別名:I 型膠原蛋白(COL I)ELISA檢測試劑盒,I 型膠原蛋白(COL I)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
CXC趨化因子配體16(CXCL16)elisa檢測試劑盒英文名稱:CXCL16 ELISA Kit,英文縮寫:CXCL16,產(chǎn)品別名:CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA檢測試劑盒,CXC趨化因子配體16(CXCL16)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
B因子(BF)elisa檢測試劑盒英文名稱:BF ELISA Kit,英文縮寫:BF,產(chǎn)品別名:B因子(BF)ELISA檢測試劑盒,B因子(BF)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
Ⅲ型膠原蛋白(COL Ⅲ)elisa檢測試劑盒英文名稱:COL Ⅲ ELISA Kit,英文縮寫:COL Ⅲ,產(chǎn)品別名:Ⅲ型膠原蛋白(COL Ⅲ)ELISA檢測試劑盒,Ⅲ型膠原蛋白(COL Ⅲ)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
3氧代5α類固醇4脫氫酶2(SRD5A2)elisa檢測試劑盒英文名稱:SRD5A2 ELISA Kit,英文縮寫:SRD5A2,產(chǎn)品別名:3氧代5α類固醇4脫氫酶2(SRD5A2)ELISA檢測試劑盒,3氧代5α類固醇4脫氫酶2(SRD5A2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
脂聯(lián)素(Adiponectin,Acrp30)elisa檢測試劑盒英文名稱:Adiponectin,Acrp30 ELISA Kit,英文縮寫:Adiponectin,Acrp30,產(chǎn)品別名:脂聯(lián)素(Adiponectin,Acrp30)ELISA檢測試劑盒,脂聯(lián)素(Adiponectin,Acrp30)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
核心蛋白聚糖(DCN)elisa檢測試劑盒英文名稱:DCN ELISA Kit,英文縮寫:DCN,產(chǎn)品別名:核心蛋白聚糖(DCN)ELISA檢測試劑盒,核心蛋白聚糖(DCN)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
NCI-H596細(xì)胞Rabbit Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG規(guī)格 0.5ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG規(guī)格 0.3ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的???抗豚鼠IgG規(guī)格 0.1ml