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產品名稱：肺癌細胞
生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)條件：Waymouth'sMB752/1+10%FBS

1:2~1:4傳代；每周換液2次。
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

N-甲基-D-天氡氨酸離子能谷氨酸受體2D(GRIN2D)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforGlutamateReceptor,Ionotropic,N-Methyl-D-Aspartate2D(GRIN2D)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產

血管**素4(ANGPT4)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforAngiopoietin4(ANGPT4)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產

白細胞激活黏附因子(ALCAM)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule(ALCAM)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產

原鈣黏素15(PCDH15)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforProtocadherin15(PCDH15)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產

雌受體β(ERβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforEstrogenReceptorBeta(ERb)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產

天冬酰胺氨基葡萄糖酶(AGA)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforAspartylglucosaminidase(AGA)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產

腺苷酸環(huán)化酶5(ADCY5)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforAdenylateCyclase5(ADCY5)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產

前列腺素D2(PGD2)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforProstaglandinD2(PGD2)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產

類固醇5α還原酶1(SRD5α1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforSteroid5AlphaReductase1(SRD5a1)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產

封閉蛋白19(CLDN19)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforClaudin19(CLDN19)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產
DMS114細胞Pregnancy zone protein  區(qū)帶蛋白PZP抗體規(guī)格 0.2ml

PRDX5/PRDX6  過氧化還原酶5/6抗體規(guī)格 0.1ml

PRDX3/peroxiredoxin 3  過氧化還原酶3抗體規(guī)格 0.1ml

PRDX2/Peroxiredoxin-SO3  硫氧還蛋白過氧化物酶2規(guī)格 0.2ml

PRDX1  過氧化還原酶1抗體規(guī)格 0.1ml

PRDM2/RIZ1  鋅指蛋白RIZ1抗體規(guī)格 0.1ml

PRDM1/Blimp1  B細胞誘導成熟蛋白1抗體規(guī)格 0.2ml