實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

產(chǎn)品名稱：B**細胞瘤細胞
母細胞樣

生長特性：懸浮生長

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法：每2-3天換液

公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
Pim-1原癌基因(PIM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforPim-1Oncogene(PIM1)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產(chǎn)

膜聯(lián)蛋白A10(ANXA10)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforAnnexinA10(ANXA10)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產(chǎn)

血管**素1(ANGPT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforAngiopoietin1(ANGPT1)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產(chǎn)

β-血小板球蛋白(βTG)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforBeta-Thromboglobulin(bTG)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產(chǎn)

蛋白酶體亞基β6(PSMβ6)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforProteasomeSubunitBetaType6(PSMb6)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產(chǎn)

白介素12B(IL12B)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforInterleukin12B(IL12B)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產(chǎn)

水通道蛋白7(AQP7)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforAquaporin7(AQP7)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產(chǎn)

端粒保護1同源物(POT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforProtectionOfTelomeres1Homolog(POT1)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產(chǎn)

蛋白Z(PROZ)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforProteinZ(PROZ)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產(chǎn)

抗存活素抗體(Anti-Surv)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法)  ELISAKitforAnti-SurvivinAntibody(Anti-Surv)  規(guī)格：48T/96T  進口、國產(chǎn)
GA-10(Clone4)細胞phospho-SLK/FYN (Tyr530)  磷酸化酪氨酸蛋白激酶Fyn/同步原癌基因抗體規(guī)格 0.1ml

phospho-SLC29A4(Tyr198)  磷酸化腦質(zhì)膜單胺轉(zhuǎn)運蛋白PMAT抗體規(guī)格 0.1ml

phospho-SLAMF1(Tyr281)  磷酸化信號細胞活化分子CD150抗體規(guī)格 0.1ml

phospho-SIRT6(Ser338)  磷酸化沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體規(guī)格 0.1ml

Phospho-SIRT1(Ser47)  磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體規(guī)格 0.1ml

Phospho-SirT1 (Ser27)  磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體規(guī)格 0.1ml

Phospho-SHP2/SHIP2(Tyr81)  磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體規(guī)格 0.1ml
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。