產(chǎn)品名稱：胰腺癌細胞
形態(tài)特性：上皮細胞

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)條件：RPMI1640+2mMGlutamine+10%FBS.

1:2-1:6傳代，2-3天換液1次。

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凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)elisa檢測試劑盒英文名稱：AMPK ELISA Kit，英文縮寫：AMPK，產(chǎn)品別名：磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA檢測試劑盒，磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集素3(Lgals3)elisa檢測試劑盒英文名稱：Lgals3 ELISA Kit，英文縮寫：Lgals3，產(chǎn)品別名：可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集素3(Lgals3)ELISA檢測試劑盒，可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集素3(Lgals3)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

雷帕霉素靶蛋白(mTOR)elisa檢測試劑盒英文名稱：mTOR ELISA Kit，英文縮寫：mTOR，產(chǎn)品別名：雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA檢測試劑盒，雷帕霉素靶蛋白(mTOR)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)elisa檢測試劑盒英文名稱：PA-IgG/M/A ELISA Kit，英文縮寫：PA-IgG/M/A，產(chǎn)品別名：人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA檢測試劑盒，人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

人抗凝血酶受體(ATR)elisa檢測試劑盒英文名稱：ATR ELISA Kit，英文縮寫：ATR，產(chǎn)品別名：人抗凝血酶受體(ATR)ELISA檢測試劑盒，人抗凝血酶受體(ATR)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)elisa檢測試劑盒英文名稱：ARPA/Rib-P ELISA Kit，英文縮寫：ARPA/Rib-P，產(chǎn)品別名：人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)ELISA檢測試劑盒，人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

人抗BP180抗體(anti-BP180-Ab)elisa檢測試劑盒英文名稱：anti-BP180-Ab ELISA Kit，英文縮寫：anti-BP180-Ab，產(chǎn)品別名：人抗BP180抗體(anti-BP180-Ab)ELISA檢測試劑盒，人抗BP180抗體(anti-BP180-Ab)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

解整合素樣金屬蛋白酶12(ADAM12)elisa檢測試劑盒英文名稱：ADAM12 ELISA Kit，英文縮寫：ADAM12，產(chǎn)品別名：解整合素樣金屬蛋白酶12(ADAM12)ELISA檢測試劑盒，解整合素樣金屬蛋白酶12(ADAM12)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)elisa檢測試劑盒英文名稱：TBG ELISA Kit，英文縮寫：TBG，產(chǎn)品別名：甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA檢測試劑盒，甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)elisa檢測試劑盒英文名稱：TIMP-1 ELISA Kit，英文縮寫：TIMP-1，產(chǎn)品別名：基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA檢測試劑盒，基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)elisa檢測試劑盒英文名稱：Tn-Ⅰ ELISA Kit，英文縮寫：Tn-Ⅰ，產(chǎn)品別名：肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA檢測試劑盒，肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。
PSN1細胞phospho-MyoD1(Ser200)  磷酸化肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體規(guī)格 0.1ml

phospho-MYL9(Thr19)  磷酸化肌球蛋白輕鏈9抗體規(guī)格 0.1ml

phospho-MYL6(Tyr29+Ser30)  磷酸化肌球蛋白輕鏈6抗體規(guī)格 0.1ml

Phospho-MYL(Ser19)  磷酸化肌球蛋白輕鏈2抗體規(guī)格 0.1ml

phospho-MYF5 (phospho Ser49)  磷酸化生肌決定因子Myf5抗體規(guī)格 0.1ml

Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375)  磷酸化μ-型受體抗體規(guī)格 0.1ml

Phospho-mTOR (Tyr144)  磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體規(guī)格 0.1ml