公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號(hào)
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PAXCS-010細(xì)胞
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T25
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FS-X3935
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產(chǎn)品名稱:源胰腺癌細(xì)胞
形態(tài)特性:上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
傳代方法:1:3傳代,CQ-4天傳1次
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
細(xì)胞色素P450家族成員1B1(CYP1B1)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:CYP1B1 ELISA Kit,英文縮寫(xiě):CYP1B1,產(chǎn)品別名:細(xì)胞色素P450家族成員1B1(CYP1B1)ELISA檢測(cè)試劑盒,細(xì)胞色素P450家族成員1B1(CYP1B1)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
微球粒蛋白1(MCRS1)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:MCRS1 ELISA Kit,英文縮寫(xiě):MCRS1,產(chǎn)品別名:微球粒蛋白1(MCRS1)ELISA檢測(cè)試劑盒,微球粒蛋白1(MCRS1)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員5B(WNT5B)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:WNT5B ELISA Kit,英文縮寫(xiě):WNT5B,產(chǎn)品別名:無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員5B(WNT5B)ELISA檢測(cè)試劑盒,無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員5B(WNT5B)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
外切酶體成分6(EXOSC6)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:EXOSC6 ELISA Kit,英文縮寫(xiě):EXOSC6,產(chǎn)品別名:外切酶體成分6(EXOSC6)ELISA檢測(cè)試劑盒,外切酶體成分6(EXOSC6)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:TOP2 ELISA Kit,英文縮寫(xiě):TOP2,產(chǎn)品別名:拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)ELISA檢測(cè)試劑盒,拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
突觸囊泡蛋白Ⅹ(SYT10)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:SYT10 ELISA Kit,英文縮寫(xiě):SYT10,產(chǎn)品別名:突觸囊泡蛋白Ⅹ(SYT10)ELISA檢測(cè)試劑盒,突觸囊泡蛋白Ⅹ(SYT10)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡE肽1(GTF2E1)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:GTF2E1 ELISA Kit,英文縮寫(xiě):GTF2E1,產(chǎn)品別名:通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡE肽1(GTF2E1)ELISA檢測(cè)試劑盒,通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡE肽1(GTF2E1)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
糖磺基轉(zhuǎn)移酶9(CHST9)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:CHST9 ELISA Kit,英文縮寫(xiě):CHST9,產(chǎn)品別名:糖磺基轉(zhuǎn)移酶9(CHST9)ELISA檢測(cè)試劑盒,糖磺基轉(zhuǎn)移酶9(CHST9)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
胎球蛋白B(FETUB)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:FETUB ELISA Kit,英文縮寫(xiě):FETUB,產(chǎn)品別名:胎球蛋白B(FETUB)ELISA檢測(cè)試劑盒,胎球蛋白B(FETUB)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
蘇氨酰tRNA合成酶(TARS)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:TARS ELISA Kit,英文縮寫(xiě):TARS,產(chǎn)品別名:蘇氨酰tRNA合成酶(TARS)ELISA檢測(cè)試劑盒,蘇氨酰tRNA合成酶(TARS)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
絲氨酸組合因子5(SERINC5)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:SERINC5 ELISA Kit,英文縮寫(xiě):SERINC5,產(chǎn)品別名:絲氨酸組合因子5(SERINC5)ELISA檢測(cè)試劑盒,絲氨酸組合因子5(SERINC5)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
PAXCS-010細(xì)胞Phospho-MEF2A(Thr319) 磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體規(guī)格 0.1ml
Phospho-MEF2A (Thr312) 磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體規(guī)格 0.1ml
Phospho-MEF2A (Ser408) 磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體規(guī)格 0.1ml
Phospho-MDM2(Thr218) 磷酸化雙微體2癌基因抗體規(guī)格 0.1ml
Phospho-MDM2(Ser186) 磷酸化雙微體2癌基因抗體規(guī)格 0.1ml
Phospho-MDM2 (Ser166) 磷酸化雙微體2癌基因抗體規(guī)格 0.1ml
phospho-M-CSF Receptor(Tyr809) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體規(guī)格 0.1ml