公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱
|
規(guī)格
|
貨號
|
Hs688(A).T細(xì)胞
|
T25
|
FS-X3960
|
產(chǎn)品名稱:黑色素瘤細(xì)胞
形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞
生長特性:貼壁生長
培養(yǎng)條件:DMEM+10%FBS
1:2-1:3傳代
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)elisa檢測試劑盒英文名稱:UCP1 ELISA Kit,英文縮寫:UCP1,產(chǎn)品別名:線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)ELISA檢測試劑盒,線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
細(xì)胞間粘附分子4(ICAM4)elisa檢測試劑盒英文名稱:ICAM4 ELISA Kit,英文縮寫:ICAM4,產(chǎn)品別名:細(xì)胞間粘附分子4(ICAM4)ELISA檢測試劑盒,細(xì)胞間粘附分子4(ICAM4)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
細(xì)胞周期素I(CCNI)elisa檢測試劑盒英文名稱:CCNI ELISA Kit,英文縮寫:CCNI,產(chǎn)品別名:細(xì)胞周期素I(CCNI)ELISA檢測試劑盒,細(xì)胞周期素I(CCNI)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
穩(wěn)定素1(STAB1)elisa檢測試劑盒英文名稱:STAB1 ELISA Kit,英文縮寫:STAB1,產(chǎn)品別名:穩(wěn)定素1(STAB1)ELISA檢測試劑盒,穩(wěn)定素1(STAB1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
微管蛋白γ2(TUBγ2)elisa檢測試劑盒英文名稱:TUBγ2 ELISA Kit,英文縮寫:TUBγ2,產(chǎn)品別名:微管蛋白γ2(TUBγ2)ELISA檢測試劑盒,微管蛋白γ2(TUBγ2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶1(ENPP1)elisa檢測試劑盒英文名稱:ENPP1 ELISA Kit,英文縮寫:ENPP1,產(chǎn)品別名:外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶1(ENPP1)ELISA檢測試劑盒,外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶1(ENPP1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
脫氧胞苷激酶(DCK)elisa檢測試劑盒英文名稱:DCK ELISA Kit,英文縮寫:DCK,產(chǎn)品別名:脫氧胞苷激酶(DCK)ELISA檢測試劑盒,脫氧胞苷激酶(DCK)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
突觸回蛋白3(SYNGR3)elisa檢測試劑盒英文名稱:SYNGR3 ELISA Kit,英文縮寫:SYNGR3,產(chǎn)品別名:突觸回蛋白3(SYNGR3)ELISA檢測試劑盒,突觸回蛋白3(SYNGR3)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
天青殺素1(AZU1)elisa檢測試劑盒英文名稱:AZU1 ELISA Kit,英文縮寫:AZU1,產(chǎn)品別名:天青殺素1(AZU1)ELISA檢測試劑盒,天青殺素1(AZU1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
糖磺基轉(zhuǎn)移酶10(CHST10)elisa檢測試劑盒英文名稱:CHST10 ELISA Kit,英文縮寫:CHST10,產(chǎn)品別名:糖磺基轉(zhuǎn)移酶10(CHST10)ELISA檢測試劑盒,糖磺基轉(zhuǎn)移酶10(CHST10)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
羧肽酶E(CPE)elisa檢測試劑盒英文名稱:CPE ELISA Kit,英文縮寫:CPE,產(chǎn)品別名:羧肽酶E(CPE)ELISA檢測試劑盒,羧肽酶E(CPE)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
Hs688(A).T細(xì)胞Phospho-HP1 gamma (Ser93) 磷酸化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體規(guī)格 0.1ml
phospho-HP1 alpha (Tyr24) 磷酸化異染色質(zhì)蛋白1抗體(果蠅)規(guī)格 1ml
phospho-HOMER3(Thr36) 磷酸化HOMER3蛋白抗體規(guī)格 0.1ml
phospho-HNF4 (Ser313) 磷酸化肝細(xì)胞核因子4α抗體規(guī)格 0.1ml
phospho-HNF4 (Ser304) 磷酸化肝細(xì)胞核因子4α抗體規(guī)格 0.1ml
phospho-HMGN1(Ser20+Ser24) 磷酸化高遷移率核小體結(jié)合蛋白1規(guī)格 0.1ml
phospho-HMGCR(Ser872) 磷酸化三羥基基輔酶A還原酶抗體規(guī)格 0.1ml